声明
摘要
1 前言
1．1 锰中毒的研究进展
1．1．1 锰中毒对神经系统的影响
1．1．2 锰中毒对生殖系统的影响
1．1．3 锰中毒对免疫系统的影响
1．2 炎症因子在毒理学中的研究进展
1．2．1 肿瘤坏死因子-α
1．2．2 核因子-κB
1．2．3 环氧合酶-2与一氧化氮合酶
1．2．4 前列腺素E合酶
1．3 细胞因子在毒理学中的研究进展
1．3．1 细胞因子与免疫及免疫毒性之间关系的简介
1．3．2 白介素及干扰素在毒理学中的研究进展
1．4 试验研究的目的与意义
2 材料与方法
2．1 仪器与试剂
2．1．1 仪器
2．1．2 试剂及配制
2．2 鸡脾脏淋巴细胞的分离、培养及活力鉴定
2．2．1 细胞的分离与培养
2．2．2 细胞活力鉴定
2．3 检测项目与方法
2．3．1 引物的设计与合成
2．3．2 细胞总RNA的提取
2．3．3 cDNA的合成
2．3．4 基因的PCR扩增
2．3．5 基因序列测序鉴定及分析
2．3．6 实时定量PCR
2．4 数据分析与统计
3 结果与分析
3．1 qPCR法检测目的基因mRNA水平方法的建立
3．1．1 总RNA的抽提与鉴定
3．1．2 目的基因实时qPCR方法的鉴定
3．2 锰对鸡脾脏淋巴细胞中炎症因子mRNA表达水平的影响
3．2．1 锰对鸡脾脏淋巴细胞中TNF-α mRNA表达水平的影响
3．2．2 锰对鸡脾脏淋巴细胞中NF-κB mRNA表达水平的影响
3．2．3 锰对鸡脾脏淋巴细胞中COX-2 mRNA表达水平的影响
3．2．4 锰对鸡脾脏淋巴细胞中iNOS mRNA表达水平的影响
3．2．5 锰对鸡脾脏淋巴细胞中PTGES mRNA表达水平的影响
3．3 锰对鸡脾脏淋巴细胞中细胞因子mRNA表达水平的影响
3．3．1 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-2 mRNA表达水平的影响
3．3．2 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-12β mRNA表达水平的影响
3．3．3 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IFN-γ mRNA表达水平的影响
3．3．4 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-4 mRNA表达水平的影响
3．3．5 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-6 mRNA表达水平的影响
3．3．6 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-17 mRNA表达水平的影响
4 讨论
4．1 锰对鸡脾脏淋巴细胞中炎症因子TNF-α、NF-κB、iNOS、COX-2和PTGES mRNA表达水平的影响
4．2 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-2、IFN-γ和IL-12β mRNA表达水平的影响
4．3 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-4 mRNA表达水平的影响
4．4 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-6 mRNA表达水平的影响
4．5 锰对鸡脾脏淋巴细胞中IL-17 mRNA表达水平的影响
5 结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
