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乳杆菌T3L改善肥胖小鼠骨量流失作用及肠道免疫机制研究

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摘 要

Abstract

第1章 绪 论

1.1 课题研究背景及研究目的和意义

1.2 骨质疏松症概述

1.3 高脂膳食与骨质疏松症

1.4 肠道菌群与骨的关系

1.4.1 肠道菌群组成

1.4.2 高脂膳食与肠道菌群

1.4.3 肠道菌群对骨的影响

1.5 益生菌对骨的影响

1.5.1 益生菌概述

1.5.2 益生菌对骨健康的影响

1.6 短链脂肪酸与结肠免疫及破骨细胞的关系

1.6.1 益生菌与短链脂肪酸的关系

1.6.2 短链脂肪酸与免疫作用

1.6.3 Tregs与破骨细胞的关系

1.7 国内外文献综述的简析

1.8 本课题主要研究内容

1.8.1 研究内容

1.8.2 本课题的技术路线

第2章 材料和方法

2.1 实验材料及仪器

2.1.1 实验材料

2.1.2 主要试剂与仪器设备

2.1.3 主要试剂配制

2.2 菌株的制备

2.2.1 菌落计数

2.2.2 菌株准备

2.3 动物实验

2.3.1 肥胖小鼠模型的建立和分组

2.3.2 实验样本的制备

2.4 小鼠肥胖相关指标的测定

2.4.1 肥胖一般性指标的测定

2.4.2 血清甘油三酯及总胆固醇含量的测定

2.5 乳杆菌对高脂膳食小鼠骨性能的影响

2.5.1 股骨生物力学测定

2.5.2 骨组织形态学的测定

2.6 高通量测序技术分析小鼠肠道菌群

2.6.1 小鼠粪便DNA提取

2.6.2 PCR扩增

2.6.3 序列生物信息基本分析

2.6.4 粪便短链脂肪酸含量的测定

2.7 全身免疫系统的测定

2.7.1 结肠免疫组化

2.7.2 RT-qPCR检测Tregs相关因子的表达

2.7.3 RT-qPCR检测HDAC通路的表达

2.8 数据统计与分析

第3章 乳杆菌T3L对高脂膳食小鼠肥胖以及骨损伤的抑制作用研究

3.1 前言

3.2 乳杆菌T3L对小鼠肥胖相关指标的影响

3.2.1 菌落计数

3.2.2 乳杆菌T3L 对小鼠体重的影响

3.2.3 乳杆菌T3L 对小鼠Lee’s 指数的影响

3.2.4 乳杆菌T3L 对小鼠体脂率的影响

3.2.5 乳杆菌T3L 对小鼠脏器指数的影响

3.2.6 乳杆菌T3L对小鼠血清TG、TC的影响

3.3 乳杆菌T3L 对高脂膳食小鼠骨损伤的抑制作用

3.3.1 乳杆菌T3L 对高脂膳食小鼠股骨生物力学的影响

3.3.2 乳杆菌T3L对高脂膳食小鼠骨组织形态学的影响

3.4 本章小结

第4章 乳杆菌T3L对高脂膳食小鼠肠道菌群的影响

4.1 前言

4.2 OTU分析结果

4.3 物种及其丰度分析

4.4 Alpha多样性分析

4.4.1 Alpha多样性指数计算

4.4.2 稀疏曲线绘制结果

4.5 Beta多样性分析

4.6 小鼠粪便中短链脂肪酸的变化

4.6.1 小鼠肠道产短链脂肪酸菌群的变化

4.6.2 灌胃乳杆菌对肥胖小鼠粪便SCFAs 的影响

4.7 本章小结

第5章 乳杆菌T3L对高脂膳食小鼠全身免疫系统调节

5.1 前言

5.2 Foxp3+Tregs在结肠中的表达

5.3 全身免疫器官对Tregs相关免疫因子水平表达

5.4 全身免疫器官HDAC通路的表达

5.5 本章小结

结 论

参考文献

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