苏云金杆菌芽胞中华亚种中一种具有杀线虫活性新毒素的初步鉴定及其与苏云金素的代谢关系

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis，简称Bt）是一种在土壤中广泛分布的革兰氏阳性细菌。在其生长的过程中，会向胞外分泌一些小分子代谢物。如苏云金素（thuringienisn，简称Thu）和双效菌素（Zwittermicin A，简称ZwA）等。它们对许多农业害虫都具有毒杀活性，有着广阔的应用前景。
　　苏云金芽胞杆菌中华亚种（B．thuringiensis subsp．chinensis）CT-43菌株是本室分离得到的一株高产苏云金素的野生菌株。本研究将CT-43在LB培养基中培养至指数期末期，采用有机溶剂萃取法提取上清液中的苏云金素。HPLC（Higherpressure liquid chromatogram）检测结果显示上清萃取液含两个主峰。经HPLC-MS（HPLC-Mass spectrometry）进一步分析鉴定，保留时间为7 min的峰为苏云金素特征吸收峰，保留时间为6 min左右的峰为未知代谢物吸收峰，本研究将其命名为Tox-x。通过液质联用分析，得出其分子量是677。通过与目前已报道的苏云金杆菌所产代谢物进行比较，确定Tox-x为一新型代谢物。本研究进一步以秀丽小杆线虫为目标害虫对其进行活性检测，发现Tox-x对秀丽小杆线虫具有毒杀活性，原液稀释6.25倍的线虫致死率达到90％。
　　本研究进一步通过确立培养基配方，补料成分及补料时间，分别得到产高纯度苏云金素的发酵工艺和产高纯度Tox-x的培养基。研究结果如下：将CT-43菌株在G培养基中培养至第20 h，同时补柠檬酸钠和葡萄糖至终浓度分别为．2.0 g L-1和16 gL-1，再继续发酵32 h，然后采用有机溶剂萃取法提取上清液中的苏云金素。HPLC检测结果显示，此发酵工艺制备的苏云金素峰面积占初提物总峰面积的74.84％，比用LB培养基发酵所得提取物中苏云金素占总峰面积的29.85％提高了一倍多。通过改变LB培养基中各营养物质的浓度，得到产高纯度的Tox-x的LB-1培养基。其配方是：酵母提取物浓度为18 g L-1，胰蛋白胨浓度为15 g L-1，氯化钠浓度为10 g L-1。将CT-43在LB-1培养基中发酵32 h，然后将发酵上清萃取液进行HPLC分析，结果显示LB-1培养基发酵所得提取物中Tox-x峰面积占初提物总峰面积66.59％，比用LB培养基发酵所得提取物中。Tox-x占总峰面积的31.76％提高了两倍多。
　　本研究同时将本室保存的6株CT-43质粒消除突变株进行了产苏云金素或Tox-x的HPLC检测，研究发现CT-43-7只能产生高纯度的苏云金素，不产Tox-x；而突变株CT-43-55只产Tox-x，而不产苏云金素。所以可以用相应的突变株来提纯苏云金素和Tox-x。

著录项

作者
刘要;
展开▼
作者单位

华中农业大学;

展开▼
授予单位华中农业大学;
学科微生物学
授予学位硕士
导师姓名阮丽芳,孙明;
年度 2009
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类有孢子杆菌;
关键词
苏云金芽胞杆菌; 苏云金素; 发酵工艺; 杀线虫活性;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 应用双水相萃取技术分离纯化苏云金杆菌库斯塔克亚种和苏云金亚种的β-外毒素 [J] . 杨玉焕 ,王志英 ,闫洪波 . 东北林业大学学报 . 2009,第003期
2. 苏云金杆菌δ-内毒素、芽孢及苏云金素A对棉铃虫毒性及拒食性的比较 [J] . 张继红 ,王琛柱 . 昆虫学报 . 2000,第0S1期
3. 苏云金杆菌CT-43菌株质粒与ICPs及苏云金素产生的关系研究 [J] . 张剑冰 ,欧广东 ,孙明 . 华中农业大学学报 . 1993,第6期
4. 一株具有杀松材线虫活性海洋真菌的筛选和初步鉴定 [J] . 徐中强 ,于洁 ,刘超 . 青岛大学学报（工程技术版） . 2013,第002期
5. 一株苏云金亚种的发酵产物对柳蚜3种保护酶活性的影响 [J] . Tang Xiaomeng ,Mao Hongbo . 中国林副特产 . 2019,第001期
6. 一种具有杀线虫活性的1,3,4-噁二唑双硫醚衍生物的水解特性 [C] . CHEN Ling-zhu ,陈泠竹 ,HU De-yu . 中国化工学会农药专业委员会第十八届年会 . 2018
7. 苏云金素合成基因簇的初步定位及苏云金素与杀虫晶体蛋白的协同作用 [A] . 董纯明 . 2006

苏云金杆菌芽胞中华亚种中一种具有杀线虫活性新毒素的初步鉴定及其与苏云金素的代谢关系

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅