声明
摘要
1.1研究意义
1.2研究现状
1.2.1 AP2a家族
1.2.2 AP2a的生物学功能
1.2.3 AP2a与疾病
1.2.4 RNA聚合酶Ⅲ基因转录
1.2.5 RNA聚合酶Ⅲ与疾病
1.3此课题产生的依据和研究目标
第2章材料与方法
2.1实验材料
2.1.1实验仪器和平台
2.1.2实验耗材与试剂
2.2实验方法
2.2.1基因克隆
2.2.2细胞培养
2.2.3细胞瞬时转染
2.2.4细胞稳定转染以及稳定细胞系的筛选
2.2.5 Qautitative Real-Tim PCR(RT-qPCR)
2.2.6 Western blot
2.2.7细胞增殖实验
2.2.8双荧光检测报告基因活性
2.3实验数据处理
第3章实验结果
3.3 FLNA过表达抑制AP2a的表达
3.4 AP2a瞬时敲低显著抑制Pol Ⅲ、BRF1和TFIIIC2基因的表达
3.5 AP2a敲低稳定细胞系的建立
3.6 AP2a shRNA稳定表达抑制Pol Ⅲ、BRF1和TFIIIC2基因的表达
3.7 AP2a瞬时过表达显著增加Pol Ⅲ、BRF1和TFIIIC2基因的表达
3.8AP2a过表达稳定细胞系的建立及其对Pol Ⅲ、BRF1和TFIIIC2基因表达的影响
3.9 FLNA-AP2a双敲低细胞系的建立
3.10 FLNA-AP2a双敲低对Pol Ⅲ、BRF1和TFIIIC2的基因表达的影响
3.11 AP2a敲低抑制细胞增殖
3.12 AP2a过表达促进细胞增殖
3.13 AP2a敲低和过表达影响BRF1和TFIIIC2启动子活性
4.1结论与讨论
4.2展望
致谢
参考文献
附录