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白藜芦醇通过激活AMPK抑制内源活性氧产生促进衰老骨髓间充质干细胞向成骨分化

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目录

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摘要

1.1 骨质疏松研究现状

1.1.1 骨质疏松与年龄相关性

1.1.2 骨质疏松治疗方法

1.1.3 骨质疏松与MSC的相关性

1.2 白藜芦醇的研究现状

1.3 活性氧(ROS)与AMPK的研究现状

1.4 本文的研究内容与研究意义

第2章 小鼠月龄对BMSCs功能的影响

2.1 实验材料与方法

2.1.1 试剂和仪器设备

2.1.2 细胞提取和培养

2.1.3 茜素红检测

2.1.4 成脂分化测定

2.1.5 流式细胞术细胞鉴定

2.1.7 β-半乳糖苷酶检测细胞衰老

2.2 结果

2.2.1 BMSCs细胞鉴定

2.2.2 小鼠月龄对BMSCs增殖的影响

2.2.3 小鼠月龄对BMSCs老化的影响

2.3 讨论

2.4 本章小结

第3章 白藜芦醇通过抑制BMSCs老化促进成骨分化

3.1 实验材料与方法

3.1.1 试剂和仪器设备

3.1.3 乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测

3.1.4 流式细胞术细胞凋亡检测

3.1.7 RT-PCR成骨相关标志基因表达

3.2 结果

3.2.1 白藜芦醇对BMSCs毒性的影响

3.2.2 白藜芦醇对细胞凋亡的影响

3.2.3 白藜芦醇抑制BMSCs老化

3.2.4 白藜芦醇促进BMSCs成骨分化

3.2.5 白藜芦醇促进BMSCs成骨相关标志基因表达

3.3 讨论

3.4 本章小结

第4章 白藜芦醇通过AMPK-ROS信号通路促进BMSCs成骨分化

4.1 实验材料与方法

4.1.1 试剂和仪器设备

4.1.2 活性氧检测

4.1.3 RT-PCR检测

4.1.4 Western blot检测

4.1.5 茜素红染色

4.2 结果

4.2.1 白藜芦醇抑制BMSCs胞内活性氧产生

4.2.2 白藜芦醇促进AMPK磷酸化

4.2.3 白藜芦醇与化合物c共处理后抑制BMSCs成骨分化

4.2.4 白藜芦醇通过AMPK-ROS促进BMSCs成骨分化机制

4.3 讨论

4.4 本章小结

5.1 结论

5.2 展望

致谢

参考文献

附录

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摘要

骨质疏松是一种年龄退行性疾病,主要症状是骨量减少、骨微结构发生变化。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是成骨细胞的祖细胞,具有多向分化功能,但是老化的BMSCs细胞的成骨分化能力减弱,成脂分化能力增强,因此,老年人的骨质疏松治疗难度较大。抑制BMSCs老化,促进其成骨分化能力是提高老年人骨骼质量的一个突破途径。白藜芦醇具有抗氧化、抗炎等功能,那么白藜芦醇能否抑制BMSCs老化,促进其成骨分化,进而治疗老年入骨质疏松呢?本研究对来源不同月龄小鼠的BMSCs研究发现,随着月龄增加,老化的BMSCs占比增加,细胞增殖速率减慢。加入白藜芦醇后,BMSCs老化现象减少,且呈现浓度依赖性,同时,BMSCs的成骨分化能力显著增强。进一步研究发现,白藜芦醇逆转BMSCs老化的作用是通过激活AMPK信号通路,抑制细胞内活性氧的产生而实现的。这些结果的发现,揭示了白藜芦醇促进BMSCs成骨分化的机制,为老年人骨质疏松的治疗提供了新的方向。

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