靶向端粒g-四链体DNA的抗肿瘤铂化合物的合成、表征及其作用机理研究

声明

摘要

第一章 前言

1．1 G-四链体DNA结构及其生物功能

1．1．1 G-四链体DNA结构特征

1．1．2 G-四链体DNA的生物学功能

1．2 端粒和端粒G-四链体结构

1．2．1 端粒及其功能

1．2．2 端粒G-四链体结构

1．3 靶向G-四链体DNA的小分子化合物的研究进展

1．3．1 靶向G-四链体DNA的有机化合物的研究进展

1．3．2 靶向G-四链体DNA金属配合物研究进展

1．4 本论文的设计思路

1．5 本论文合成配合物的结构式及命名

第二章 多吡啶铂(Ⅱ)配合物的合成和表征

2．1 引言

2．2 实验原料、试剂及仪器设备

2．3 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉类铂配合物的设计合成

2．3．1 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉类铂配合物的合成路线

2．3．2 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉中间体的合成

2．3．3 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉铂配合物的合成

2．4 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉铂配合物的表征

2．5 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉配合物合成讨论

2．5．1 邻菲咯啉-5，6-二酮合成

2．5．2 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉配体的合成

2．5．3 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉二氯化铂中间体的合成

2．5．4 芳基咪唑[4，5-f][1，10]菲咯啉配合物的合成

第三章 铂(Ⅱ)配合物抗肿瘤活性及抑制端粒酶活性研究

3．1 引言

3．2 实验仪器与试剂

3．3 实验方法

3．3．1 细胞的接种与培养

3．3．2 配合物细胞水平的活性初筛

3．3．3 配合物抗肿瘤活性机制的初步研究

3．4 结果及讨论

3．4．1 配合物在体外对肿瘤细胞的抑制率

3．4．2 配合物在体外对肿瘤细胞株的IC50值的测定

3．4．3 流式细胞术检测配合物1-9对肿瘤细胞HeLa周期的影响

3．4．4 流式细胞术研究配合物1-9诱导肿瘤细胞HeLa凋亡的情况

3．4．5 配合物1-9对HeLa端粒酶活性抑制作用及hTERT mRNA表达的影响

3．4 本章小结

第四章 铂(Ⅱ)配合物与G-四链体DNA相互作用研究

4．1 引言

4．2 实验试剂与仪器

4．2．1 实验试剂

4．2．2 实验仪器

4．3 溶液配制

4．4 小分子化合物与G-四链体DNA相互作用的研究方法

4．4．1 圆二色光谱法(CD)

4．4．2 荧光共振能量转移技术(FRET)

4．4．3 荧光竞争技术(G4-FID)

4．4．4 紫外可见吸收光谱(UV-Vis)

4．5 甲氧基取代配合物1-13与DNA相互作用结果及讨论

4．5．1 紫外光谱研究甲氧基取代配合物1-13稳定性

4．5．2 紫外光谱研究甲氧基取代配合物1-13与DNA的静电作用

4．5．3 配合物1-13与DNA相互作用的紫外光谱滴定

4．5．4 配合物1-13对不同DNA的选择性研究

4．5．5 配合物1、5、8、10、12对端粒G-四链体H21T的稳定能力研究

4．5．6 配合物1-13与DNA相互作用的圆二色谱(CD)

4．6 羟基、硝基和二甲胺基取代的配合物14-21与DNA相互作用结果及讨论

4．6．1 紫外光谱研究配合物14-21稳定性

4．6．2 紫外光谱法研究配合物14-21与DNA的静电作用

4．6．3 配合物14-21与DNA相互作用的紫外光谱滴定

4．6．4 配合物14-21对不同DNA的选择性研究

4．6．5 配合物14、17和21对端粒G-四链体H21T的稳定能力研究

4．6．6 配合物14-21与DNA相互作用的圆二色谱(CD)

4．7 其他配合物与G-四链体的相互作用研究

4．8 本章小结

第五章 总结

参考文献

附录

致谢

攻读博士学位期间主要的研究成果