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红参对2型糖尿病大鼠肾组织Nephrin影响的研究

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插图和附表清单

缩略语表

第一章前言

第二章实验材料与方法

2.1 实验大鼠

2.2 实验所需的试剂

2.3 实验仪器

2.4 实验方法

2.5 统计学分析

第三章结果

3.1 一般状况

3.2 红参对T2DM大鼠体重的影响

3.3 红参对T2DM大鼠尿量的影响

3.4 红参对肾重、肾重/体重的影响

3.5 红参对T2DM大鼠空腹血糖的影响

3.6 红参对T2DM大鼠TC的影响

3.7 红参对T2DM大鼠TG的影响

3.8 红参对T2DM大鼠血清BUN、Scr的影响

3.9 红参对24小时尿蛋白排泄量的比较

3.10 HE染色法比较每组大鼠肾组织的形态改变

3.11免疫组化比较每组大鼠肾组织Nephrin蛋白表达

第四章讨论

4.1 糖尿病肾病的发病机理

4.2 糖尿病肾病中医病名及病因病机

4.3 选择红参的目的

4.4 Nephrin蛋白与糖尿病肾病

4.5 红参汤对T2DM大鼠肾组织的保护作用

第五章结论

参考文献

致谢

综述:中医药对2型糖尿病大鼠肾组织Nephrin蛋白的研究进展

1. Nephrin的结构、分布

2. Nephrin与DN

3. 西药对Nephrin蛋白的作用

4. 中药对Nephrin蛋白的作用

5. 中药方剂对Nephrin的影响

6. 小结与展望

参考文献

图 1 各组肾组织病理形态学变化( HE染色)

图 2 肾组织 Nephrin蛋白免疫组化染色比较

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摘要

目的:探讨红参对2型糖尿病大鼠肾组织保护作用及机制。
  结果:方法:1.选择70只体重在140-180g之间的雄性Wistar大鼠,随机分为普通饲料组10只和高脂饲料组60只。两组均喂养6周后,给予高脂饲料组的大鼠腹腔一次性注射STZ60mg/kg,48-72h后尾静脉采血测量空腹血糖,用尿糖试纸检测尿糖,以16.7mmol/L≤血糖<30mmol/L,尿糖出现强阳性,并连续3次达到上述标准的大鼠可归为糖尿病组。将符合标准的60只大鼠随机分为3组:实验组20只:按lml/lOO(g.d)的比例灌胃红参;阳性对照组:灌胃贝纳普利混悬液15mg/(kg.d);DM对照组与正常组:每日给予同等剂量的生理盐水,14周后空腹取材料后处死。2.14周后观察大鼠的一般状态,测定大鼠的体重、肾重、血糖、血脂、血肌酐,血尿素氮、24小时尿白蛋白排泄率等有关指标。3.HE染色观察肾组织的形态变化。4.免疫组化方法观察肾小球足细胞中Nephrin表达水平。5.以上所有的实验结果均用x±s表示,用统计软件SPSS16.0进行方差分析检验,P<0.05时有统计学意义。
  1.体重:药物应用第14周末,阳性对照组与实验组大鼠的体重与DM对照组比较均显著降低(P<0.01)。
  2.尿量:实验组大鼠日排尿量与正常对照组比较无明显差异(P>0.05);阳性对照组与实验组大鼠日排尿量明显低于DM对照组(P<0.01)。实验组大鼠尿量与阳性对照组大鼠的日排尿量比较显著减少(P<0.05)。
  3.右肾重/体重:与DM对照组相比,阳性对照组与实验组大鼠肾重/体重有一定的差异(P<0.05)。
  4.空腹血糖:阳性对照组与DM对照组比较血糖降低不明显(P>0.05),实验组空腹血糖明显低于DM对照组,且明显低于阳性对照组(P<0.01)。
  5.TC、TG:与DM对照组相比,实验组显著降低血清TC、TG水平(P<0.01),阳性对照组与DM对照组相比较差异不明显(P>0.05);
  6.血肌酐、血尿素氮:阳性对照组、实验组大鼠的肾功能与DM组比较有明显改善,各指标均明显降低(P<0.01),实验组与阳性对照组比较,血清中Bun及Scr水平有一定的差异(P<0.05)。
  7.24小时尿蛋白排泄量:与DM组比较,实验组的24小时尿蛋白排泄率明显降低(P<0.01);与阳性对照组比较,实验组的24小时尿蛋白排泄量有所减少(P<0.05)。
  8.肾组织病理形态学的改变: DM组表现出肾小球体积增大,系膜细胞明显增多,部分肾小管上皮细胞出现空泡变性,而阳性对照组与实验组较DM组比较肾小球系膜细胞数减少,系膜基质轻微增生,炎症细胞浸润不明显,部分肾小管上皮细胞逐渐的修复。
  9.Nephrin蛋白的表达:正常组肾小球nephrin在基底膜周围呈线段状分布,阳性分布广,棕黄色染色深度强;而DM组肾小球结构致密,阳性染色不明显,Nephrin呈散在的颗粒状分布;红参组的棕褐色染色面积较正常组少,与DM组比较染色强度明显深(P<0.01)Nephrin在基底膜周围呈点状纷分布。
  结论:红参能促进糖尿病大鼠肾脏足细胞nephrin的表达,降低蛋白尿排泄量,从而起到保护肾脏的作用。

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