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摘要
主要缩略词表
绪论
第一章 文献综述
1．1 突触简介
1．2 果蝇神经肌肉接头是研究突触的理想模型
1．3 果蝇幼虫NMJ的形态结构
1．4 果蝇幼虫NMJ的形成和发育
1．5 果蝇NMJ形态发育和可塑性的调控
1．5．1 细胞骨架
1．5．2 Wnt信号通路
1．5．3 BMP信号通路
1．5．4 神经元兴奋性
1．5．5 突触粘附分子
1．6 Neuroligin(NIg)对突触形成和突触发育的研究进展
1．6．2 NIg的分子结构
1．6．3 NIg的神经分布和突触定位
1．6．4 NIg对突触调控的体外研究
1．6．5 NIg对突触调控的在体研究
1．6．6 NIg突触发育功能在果蝇的研究
第二章 材料与方法
2．1 果蝇品系
2．2 转基因果蝇的制备
2．2．2 UAS-dnlg4-GFP转基因果蝇的制备
2．3．2 dnlg4缺失突变体果蝇的制备
2．4 DNlg4多克隆抗体的制备
2．4．1 重组质粒的构建
2．4．2 融合蛋白的表达及纯化
2．4．3 多抗制备动物的免疫
2．4．4 多抗抗血清的收集
2．4．5 多抗的亲和层析纯化
2．5 单克隆抗体的制备
2．6 免疫印迹(Western Blot)
2．7 免疫染色
2．7．1 样品的制备
2．7．2 样品的荧光免疫染色
2．7．3 荧光信号强度分析
2．8．1 dnlg4 RNA探针的合成与标记
2．8．2 果蝇胚胎的收集和处理
2．8．3 胚胎的RNA杂交
2．9 果蝇三龄幼虫NMJ电镜检测
2．9．1 样品处理
2．9．2 样品包埋
2．9．3 切片并观察
2．9．4 图像采集与统计分析
2．10 三龄幼虫NMJ电生理分析
2．10．1 三龄幼虫的解剖
2．10．2 NMJ电信号的胞内记录
2．10．3 数据分析
2．11．3 目的基因cDNA的PCR扩增
2．12 免疫共沉淀
2．12．1 组织样品收集处理
2．12．2 用相应抗体进行免疫共沉淀
2．13 Pull down实验
2．13．2 对目的蛋白进行pull down
2．14 三龄幼虫运动活性检测
2．15 三龄幼虫NMJ形态定量分析
2．16 统计方法
第三章 实验结果
引言
3．1．2 DNlg4在胚胎神经系统高表达
3．1．4 DNlg4主要分布于NMJ的突触前
3．2 突触前DNlg4调控NMJ突触的生长发育
3．2．2 DNlg4缺失导致NMJ突触发育缺陷
3．2．3 DNlg4缺失导致NMJ突触结构异常
3．2．4 dnlg4突变体未见有显著的突触分化缺陷
3．2．5 突触前DNlg4挽救dnlg4突变体的发育缺陷
3．2．6 突触前敲低DNlg4抑制NMJ突触发育
3．2．7 突触前过表达DNlg4促进NMJ突触发育
3．3 DNlg4通过调控BMP信号调控NMJ突触发育
3．3．2 过表达DNllg4导致的NMJ突触生长依赖于BMP信号
3．3．3 BMP信号升高导致的NMJ突触生长依赖于DNlg4
3．3．4 DNlg4正向调控突触前BMP信号水平
3．3．5 DNlg4特异性调控果蝇幼虫头部Tkv蛋白水平
3．3．6 DNlg4调控NMJ突触前Tkv的稳定
3．3．7 DNlg4通过其N端结构域与Tkv相互作用
3．3．8 DNlg4拮抗S6KL调控突触生长
3．3．9 DNlg4缺失导致NMJ突触功能障碍
3．3．10 DNlg4缺失突变体运动活性降低
3．4 DNlg4对突触发育的调控不依赖DNrx
3．4．2 DNlg4对突触发育的调控不依赖于DNrx
第四章 讨论
4．1 DNlg4的突触功能及其与果蝇其它NIg的区别
4．2 DNlg4以突触前作用调控突触的发育和功能
4．3 DNlg4调控突触前BMP信号进而影响突触发育
4．4 DNlg4募集并稳定突触前Tkv
4．5 DNlg4通过拮抗S6KL调控Tkv
4．6 DNlg4和DNrx在调控NMJ发育中有着相关但不相同的分子机制
4．7 展望
参考文献
致谢
作者简介
东南大学;
