多器官功能障碍综合征(MODS)患者肠道菌群结构与疾病发生相关性研究

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多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)是由多种因素引起的一种疾病，免疫、遗传、细胞凋亡以及肠道菌群结构对其具有重要影响。越来越多的研究发现肠道是MODS发生的原动力，MODS患者肠道中总厌氧菌和益生菌数量减少，而病原菌和机会性致病菌含量上升，而且具有胃肠功能障碍的MODS患者死亡率较高。因此肠道微生物是MODS发生发展及预后的重要影响因素。过去的研究多集中在单个或多个细菌对于MODS的影响，近年来随着高通量分析技术的发展，为探明肠道菌群结构与MODS发生机理提供了可能。该论文采用DGGE和SOLiD高通量测序技术两种分析方法，分别对MODS患者及健康对照肠道菌群结构进行比较分析，以进一步探明MODS发病机制，推动MODS病因的研究，为MODS的临床治疗提供理论依据。
　　本研究中，我们收集了15例MODS患者和20例正常对照人群的粪便样本，提取样本细菌总基因组DNA。首先将15例MODS患者按照MODS评分从高到低分成3组，分别为：低分组，L组，6例，MODS评分<5；中分组，M组，5例，MODS评分在5和10之间(包括5分)；高分组，H组，4例，MODS评分≥10。然后对细菌总基因组DNA的16S rRNA的V3区进行PCR扩增，进行DGGE图谱及多样性分析，分别分析MODS患者及对照人群肠道菌群的相似性，并通过Shannon-Weaver(H')指数来分析样本的条带数、均匀度指数、多样性指数、丰富度指数和优势度指数。最后挑选了3例MODS患者及3例正常对照组人群共6例样本进行SOLiD高通量测序分析。
　　该研究DGGE结果显示，L组及H组与对照组菌群结构差异显著；L组和M组样本肠道菌群结构的种类及数量、优势菌种类及相对含量均有显著差异，L组明显低于M组。M组与H组样本相比，患者肠道菌群结构差异不大，无明显统计学意义。L组与H组相比，H组肠道菌群的种类多但是数量差异不大，优势菌相对含量及种类差异显著。特异条带切胶回收克隆测序发现，MODS患者肠道中，类杆菌属(Bacteroides)、不动杆菌属(Acinetobacter)、肠球菌属(Enterococcus)和大肠杆菌(Escherichia)含量相对较高。SOLiD测序结果显示，3例MODS患者样本中肠道菌群结构体现了个体差异性和多样性，也有一定的相似性，肠球菌属(Enterococcus)含量均为第一。MODS患者与对照组人群的肠道菌群相似性较低，优势菌属差异较大，提示MODS患者肠道中独有的细菌与疾病有关，它们与MODS的关系尚需进一步的探索。

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作者
魏婷婷;
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作者单位

东南大学;

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授予单位东南大学;
学科化学；分析化学
授予学位硕士
导师姓名周东蕊;
年度 2012
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类粪便检验;
关键词
多器官功能障碍综合征; 肠道菌群结构; 变性梯度凝胶电泳; SOLiD高通量测序; 疾病发生; 相关性分析;

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