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第一章 绪论
1.1 研究背景
1.1.1 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其危害
1.1.2 细菌生物膜
1.1.3 桂皮醛概述
1.2 本研究的目的、内容及技术路线
1.2.1 研究目的
1.2.2 研究内容
1.2.3 技术路线
第二章 桂皮醛对临床分离MRSA菌株的体外抑菌试验
2.1 材料
2.1.1 菌株
2.1.2 实验药物
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要溶液及配制
2.1.5 滤纸片
2.1.6 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 临床分离MRSA耐药谱分析
2.2.2 K-B法检测不同浓度桂皮醛对MRSA的抑菌作用
2.2.3 微量琼脂稀释法检测桂皮醛的MIC和MBC
2.3 结果
2.3.1 临床分离MRSA的耐药检测
2.3.2 K-B法检测不同浓度桂皮醛对MRSA的抑菌环大小
2.3.3 MIC和MBC值
2.4 讨论
第三章 桂皮醛对体外MRSA形成生物膜的抑制作用
3.1 材料
3.1.1 菌株
3.1.2 实验药物
3.1.3 主要试剂
3.1.4 主要溶液及配制
3.1.5 主要仪器
3.2 方法
3.2.1 96孔板MRSA生物膜模型的构建
3.2.2 MTT染色法检测桂皮醛对MRSA生物膜的破坏作用
3.2.3 菌落计数法检测桂皮醛对MRSA生物膜的破坏作用
3.2.4 扫描电子显微镜(SEM)检测方法
3.2.5 激光共聚焦显微镜(CLSM)检测方法
3.2.6 数据统计分析
3.3 结果
3.3.1 96孔板构建MRSA生物膜模型结晶紫染色结果
3.3.2 MTT染色法结果
3.3.3 菌落计数法结果
3.3.4 扫描电镜结果
3.3.5 激光共聚焦显微镜结果
3.4 讨论
第四章 亚抑菌浓度桂皮醛影响MRSA生物膜形成关键基因mRNA水平的研究
4.1 材料
4.1.1 菌株
4.1.2 实验药物
4.1.3 主要试剂
4.1.4 主要试剂配制
4.1.5 主要仪器
4.2 方法
4.2.1 PCR引物设计
4.2.2 细菌基因组DNA提取
4.2.3 PCR反应体系
4.2.4 MRSA生物膜总RNA提取和反转录
4.2.5 荧光定量PCR
4.2.6 数据统计分析
4.3 结果
4.3.1 待测菌株icaA和sara基因的PCR扩增结果
4.3.2 荧光定量PCR电泳结果
4.3.3 荧光定量PCR柱形图结果
4.4 讨论
第五章 桂皮醛对SD大鼠体内MRSA生物膜抑制作用的研究
5.1 材料
5.1.1 菌株
5.1.2 实验动物
5.1.3 实验用药的制备与配置
5.1.4 主要试剂
5.1.5 主要仪器
5.2 方法
5.2.1 分组给药与生物膜模型的制备
5.2.2 生物膜内菌落计数
5.2.3 病变组织病理切片观察
5.2.4 组织总RNA的提取和逆转录
5.2.5 RT-PCR法检测病变组织周围IL-1βmRNA的变化
5.2.6 EUSA法检测血中IL-1β的浓度
5.2.7 数据统计分析
5.3 结果
5.3.1 桂皮醛对SD大鼠体内MRSA生物膜中细菌数量的影响
5.3.2 SD大鼠皮下囊袋组织病理变化
5.3.3 桂皮醛对感染MRSA生物膜SD大鼠体内IL-1βmRNA水平的影响.43
5.3.4 桂皮醛对感染MRSA生物膜SD大鼠体内IL-1β含量的影响
5.4 讨论
第六章 主要结论和展望
6.1 主要结论
6.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的文章与参加学术会议
