• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文学位 >Geranylgeranyltransferase Ⅰ介导BDNF以突触发育的作用研究
【6h】

Geranylgeranyltransferase Ⅰ介导BDNF以突触发育的作用研究

代理获取
页面导航
  • 目录
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

目录

研究生个人简介

缩略词表

摘要

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

参考文献

树突棘：结构、功能、调控及与疾病的关系

攻读硕士学位期间发表学术论文

临床培训小结

致谢

声明

论文审阅认定书

展开▼

摘要

目的研究蛋白异戊二烯基转移酶Geranylgeranyltransferase(Ⅰ)(简称GGT)对神经元突触发育的影响及机制;Bicuculline和神经活动(KCl)对神经元突触发育的影响，为神经元突触发育机制提供新的理论依据。
　　方法1.提取不同发育时期（P0，P7，P14，P21，P28，成年）的海马组织，用蛋白免疫印迹(WB)检测GGTα，β亚基的蛋白表达;2.取P14的大鼠海马组织，进行总蛋白、突触小体(Synaptosome)和突触后致密体(PSD)抽提，WB检测GGTα，β亚基是否定位于突触部位;3.在培养的海马神经元中共表达YFP和GGTβ亚基，免疫荧光化学法检测神经元单位长度突起上突触前标志物Synapsin1和突触后标志物PSD-95聚集体的数量与荧光亮度的变化;4.在培养的海马神经元中，过表达野生型GGTα及GGTα突变体GGTαK164A，GGTαY166A和GGTαY200F，用BDNF处理后，免疫荧光化学法检测Synapsin1和PSD-95聚集体的数量与荧光亮度的变化;5.在培养的海马神经元中，过表达野生型Rac1及不能被GGT修饰的Rac1突变体Rac1ΔC和Rac1C189S，免疫荧光化学法检测Synapsin1和PSD-95聚集体的数量与荧光亮度的变化;6.在培养的神经元中转染YFP，用Bicuculline，KCl，DMSO或GGTi-2147处理后，免疫荧光化学法，检测树突棘的数目的变化;7.在培养的海马神经元中，用siRNA下调GGTβ的表达，用Bicuculline，KCl，DMSO或GGTi-2147处理后，免疫荧光化学法，检测树突棘的数目的变化。
　　结果1.GGTα，β亚基的蛋白表达水平与突触发育的时间窗相吻合，在突触发育最快的时间达到高峰;GGTα，β亚基位于神经元突触部位;2.过表达GGTβ亚基对突触前、后蛋白Synapsin1，PSD-95的合成和表达有促进作用;3.GGTα的两种突变体GGTαK164A和GGTαY200F会抑制神经元突触的发育，并且可阻断BDNF对于神经元突触发育的促进作用;4.野生型Rac1能够促进突触的发育，不能被GGT修饰的Rac1突变体Rac1ΔC和Rac1C189S不仅抑制突触的发育，而且可以取消GGTβ对突触发育的促进作用;5.Bicuculline和KCl可以增加树突棘的数目而GGTi-2147却起相反的作用，并且GGTi-2147可抵消Bicuculline和KCl对树突棘的促进作用。
　　结论1.Rac1不仅促进基础状态下的神经元突触发育作用，而且介导BDNF和GGTβ诱导的突触发育。2.BDNF通过激活GGT，促进Rac1转位到细胞膜上被激活，从而促进突触发育。

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
代理获取

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号