TOLL样受体4/核转录因子-κB信号通路在脂多糖诱导奶牛乳腺炎症反应中的作用

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摘要

缩略词(Abbreviation)

第一章 乳房炎的研究进展

1 乳房炎综述

1．1 抗生素

1．2 噬菌体

1．3 接种疫苗

1．4 纳米粒子

1．5 细胞因子

1．6 天然化合物

第二章 LPS／TLR4信号转导通路

1．2 Toll样蛋白的生物学功能

2 TLR转导信号

2．1 MyD88-依赖途径

2．2 MyD88非依赖途径

2．3 TLR4信号通路的负向调控

2．4 NF-κB信号通路

第三章 蛋白质组学融合下一代基因测序

1 综述

2 蛋白质-基因组学：比蛋白质组学和基因组学更准确

3 蛋白质基因组学遇到的挑战以及机遇

4 对蛋白质基因组学定量的综合见解

5 不同分子层的交互作用

6 未来的前景

7 本研究的目的及意义

第四章 荷斯坦奶牛正常与乳房炎乳腺组织的基因表达谱芯片分析

1 材料与方法

1．1 试验动物及样品采集

1．2 RNA提取

1．3 基因芯片分析

1．4 RT-qPCR

1．5 Western Blot

1．6 数据统计

2．1 奶牛乳腺组织病理学检查

2．2 基因芯片数据的预处理

2．3 差异表达的基因

2．4 差异基因的GO与KEGG分析

2．5 芯片结果验证

2．6 免疫印迹验证芯片结果

3 讨论

4 小结

第五章 化学干涉抑制NF-κB基因对TLR4／NF-κB信号通路表达的影响

1．1 样品采集

1．2 试剂

1．3 仪器

1．4 试验方法

1．5 统计方法

2．1 奶牛乳腺上皮形态学观察

2．2 Bay11-7082对奶牛乳腺上皮细胞活力的影响

2．3 Bay11-7082对炎症反应模型奶牛上皮细胞活力的影响

2．4 Bay11-7082对炎症反应模型奶牛上皮细胞凋亡的影响

2．5 Bay11-7082对LPS诱导的乳腺上皮细胞TLR4和NF-κB蛋白表达的影响

2．6 Bay11-7082对LPS诱导的乳腺上皮细胞IL-1β和TNF-α释放的影响

2．7 共聚焦显微镜观察Bay11-7082对LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞NF-κB表达的影响

2．8 NF-κB基因对TLR4／NF-κB信号通路基因表达水平的影响

3 讨论

4 小结

第六章 基因干涉NF-κB基因对TLR4／NF-κB信号通路表达的影响

1．4 试验方法

1．5 数据处理与分析

2 结果

2．1 NF-κB-siRNA干扰引物筛选与优化

2．2 NF-κB-siRNA对LPS诱导的乳腺上皮细胞TLR4和NF-κB蛋白表达的影响

2．3 NF-κB-siRNA对LPS诱导的乳腺上皮细胞IL-1β和TNF-α释放的影响

2．5 NF-κB-siRNA基因对TLR4／NF-κB信号通路基因表达水平的影响

3 讨论

1．3 仪器

1．4 试验方法

1．5 数据处理与分析

2 结果与分析

2．1 鉴定结果统计

2．2 定量蛋白质组学的概述

2．3 差异表达的蛋白

2．4 蛋白质功能注释

3 讨论

4 小结

参考文献

全文结论

创新点

附录

致谢