稻飞虱翅发育基因的克隆、表达及wg基因在灰飞虱翅型分化中的作用

声明

摘要

第一章 文献综述

1 光周期对昆虫的影响

1．1 光周期对昆虫滞育的影响

1．2 光周期对昆虫生长发育及繁殖的影响

1．3 光周期对昆虫翅型发育的影响

2 昆虫翅分化的遗传特性

2．1 昆虫翅型的遗传响应

2．2 昆虫翅型的遗传规律

3 昆虫翅型的调控基因

3．1 Wingless基因

3．2 Distal-less基因

3．3 Fringe基因

3．4 Serum response factor基因

3．5 翅型发育相关的其它基因

4 本研究的主要内容及意义

第二章 稻飞虱的翅型筛选及光周期对翅型分化的影响

1 材料与方法

1．1 稻飞虱翅型筛选方法

1．2 光周期供试虫源

1．3 光周期处理

1．4 数据分析

2 结果与分析

2．1 稻飞虱翅型筛选响应

2．2 光周期对稻飞虱翅型分化的影晌

3 讨论

第三章 灰飞虱与白背飞虱fng、stf、dll基因的克隆与序列分析

1 材料与方法

1．1 试虫来源

1．2 总RNA提取

1．3 cDNA的合成

1．4 5’-RACE cDNA和3’-RACE cDNA的合成

1．5 PCR引物

1．6 PCR反应及条件

1．7 RCR产物回收

1．8 PCR产物连接转化

1．9 菌液PCR及电泳检测

1．10 测序与序列分析

2 结果与分析

2．1 灰飞虱和自背飞虱fng基因的克隆及序列分析

2．2 灰飞虱和白背飞虱srf基因的克隆及序列分析

2．3 灰飞虱和白背飞虱dll基因片段的克隆及序列分析

2．4 灰飞虱和白背飞虱wg、fng、srf、dll进化树分析

3 讨论

第四章 灰飞虱长、短翅品系中翅发育基因的表达差异

1 材料与方法

1．1 供试虫源

1．2 总RNA提取、cDNA的合成

1．3 相对荧光定量PCR

2 结果与分析

2．1 Wg基因在灰飞虱长、短翅型品系间的表达差异

2．2 Fng基因在灰飞虱长、短翅型品系间的表达差异

2．3 Srf基因在灰飞虱长、短翅型品系间的表达差异

2．4 Dll基因在灰飞虱长、短翅型品系间的表达差异

3 讨论

第五章 wg基因在灰飞虱翅发育中的作用

1 材料与方法

1．1 供试虫源

1．2 dsRNA的合成

1．3 dsRNA注射

1．4 荧光定量PCR引物

1．5 数据处理方法

2 结果与分析

2．1 注射不同浓度的dswg和dsGFP后长、短翅品系5龄若虫体内wg的相对表达量

2．2 注射不同浓度的dswg和dsGFP后长、短翅品系若虫及成虫体重的影响

2．3 注射不同浓度的dswg和dsGFP后长、短翅品系翅长的影响

2．4 注射不同浓度的dswg和dsGFP后长、短翅品系翅形态特征的影响

2．5 注射不同浓度的dswg和dsGFP后对长、短翅品系翅发育相关基因相对表达量的影响

3 讨论

第六章 全文总结

1 主要结论

2 主要创新点

3 不足点

参考文献

附录：攻读硕士学位期间发表的研究论文

致谢