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绵羊多产性状的DNA分子标记及相关研究

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引言

第一部分文献综述绵羊多产性分子标记研究进展

1遗传标记简介

1.1RFLP标记

1.2微卫星DNA

1.3单核苷酸多态性

2与绵羊繁殖性状有关的候选基因

2.1FecB基因

2.2FecX基因

2.3BMP15和GDF9基因

2.4其它多胎基因

2.5各种突变的相互作用

2.6BMP与绵羊多胎机理

3Tetra-ARMS PCR技术研究进展

3.1错配PCR基本原理及衍生SNP检测方法

3.2技术原理及优点

4湖羊起源与品种特点及多胎研究现状

4.1湖羊起源研究

4.2湖羊的品种特点

4.3湖羊多胎研究状况

第二部分试验研究

第一章FecB基因在7个绵羊品种中的多样性研究

1材料与方法

2.结果

3.讨论

第二章BMP15基因在7个绵羊品种中的多样性研究

1材料与方法

1.1样本采集

1.2主要仪器、设备和试剂

1.3样本DNA提取与纯度检测

1.4BMP15基因检测

2.结果

2.1FecXH基因突变

2.2FecXI基因突变

2.3FecXG基因突变

2.4FecXB突变

3.讨论

第三章GDF9基因在7个绵羊品种中的多样性研究

1材料与方法

1.1样本采集

1.2主要仪器、设备和试剂

1.3样本DNA提取与纯度检测

1.4GDF9基因FecGH多态性检测

2.结果

3.讨论

第四章湖羊微卫星多态性及其与产羔数关系

1材料与方法

1.1实验动物与样品采集

1.2微卫星标记的选择

1.3主要仪器、设备和试剂

1.4样本DNA提取和检测

1.5 PCR扩增

1.6电泳结果记录及处理

1.7数据统计及分析

2结果

2.1基因多态性

2.2微卫星位点等位基因频率分布

2.3微卫星基因型(频率)与湖羊产羔数的关系

2.4品种内的遗传变异

2.5群体间遗传距离和相似系数

3讨论

第五章FecB基因检测新方法(Tetra-ARMS PCR)建立

1.材料与方法

1.1实验动物与样本采集

1.2仪器与试剂材料

1.3基因组DNA提取

2.FecB基因检测及Tetra-ARMS PCR引物设计

2.1FecB基因PCR-RFLP检测

2.2Tetra-ARMS PCR特异性引物设计

2.3参照引物设计

2.4四引物ARMS PCR扩增体系优化

2.5四引物ARMS PCR扩增和电泳

2.6四引物ARMS PCR引物扩增结果判读和意义

3.结果

3.1扩增条件优化

3.2引入错配对特异性的影响

3.3与PCR-RFLP方法的比较

4.讨论

参考文献

全文结论

创新

附录

攻读博士学位期间发表的学术论文目录

致谢

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摘要

本文首先综述了绵羊多产性分子标记的研究进展:包括遗传标记简介、与绵羊繁殖性状有关的候选基因、TeraARMS PCR技术研究进展以及湖羊起源与品种特点的多胎研究现状。 然后进行了以下实验研究:1.FecB基因在7个绵幸品种中的多样性研究 2.BMP15基因在7个绵羊品种中的多样性研究 3.GDFg基因在7个绵羊品种中的多样性研究。 接着探讨了湖羊微卫星多态性及其与产羔数关系。 最后给出了一种FecB基因检测新方法:Tetra-ARMS PCR法。 研究表明: 1.发现湖羊群体中存在少数 GDFg和 BMP15基因的FecG”和 FCcX“突变个体,推测这些个体为不育个体。 2.发现 Lscv043位点中基因型为 110bpllobp所对应的湖羊第一胎平均产羔数最高; 300U位点中基因型为 148hP/148bP所对应的湖羊总体乎均产羔数最高。位点Lscv043和BMS2508中不同基因型群体产羔数有显著差异。 3.建立了快速检测Fe CB基囚的四引物*RM s*PC R方法,使得检测成本降低。

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