青石斑鱼B淋巴细胞刺激因子(BAFF)及斑马鱼TNFSF14的克隆、表达及生物学功能研究

声明

摘要

前言

第一章 B淋巴细胞刺激因子(队FF)的研究进展

1．1 BAFF的分子结构与表达分布

1．2 BAFF受体的表达分布与结构

1．3 BAFF介导的信号通路

1．4 BAFF的主要生物学功能

1．4．1 BAFF对B细胞生长发育的影响

1．4．2 BAFF对T细胞生长发育的影响

1．5 BAFF与相关疾病

1．5．1 BAFF与免疫缺陷

1．5．2 BAFF与自身免疫病

1．5．3 BAFF与恶性肿瘤

1．6 结论与展望

第二章 LIGHT的研究进展

2．1 LIGHT简介

2．2 与LIGHT有关的信号通路

2．3 LIGHT的生物学功能

2．3．1 对T淋巴细胞的作用

2．3．2 HVEM依赖的HSV感染的阻断作用

2．3．3 LIGHT对肿瘤细胞的作用

2．4 LIGHT相关的免疫疾病

2．5 结论与展望

第三章 石斑鱼及斑马鱼研究状况

3．1 青石斑鱼的研究

3．2 斑马鱼的研究

第四章 石斑鱼BAFF的克隆表达

4．1 实验材料

4．1．1 实验动物、质粒、宿主菌

4．1．2 试剂和耗材

4．1．3 主要实验仪器

4．2 实验方法

4．2．1 青石斑鱼BAFF基因的克隆

4．2．2 Real-time PCR检测EaBAFF的组织分布

4．2．3 生物信息学分析

4．2．4 表达载体pET28a-EasBAFF的构建

4．2．5 重组EasBAFF在大肠杆菌中的表达、鉴定及纯化

4．2．6 EasBAFF的Wbstern Blot鉴定

4．2．7 重组蛋白EasBAFF的活性鉴定

4．3 实验结果与分析

4．3．1 青石斑鱼BAFF全长cDNA序列及对应的氨基酸序列

4．3．2 EaBAFF氨基酸序列的同源比对分析

4．3．3 蛋白空间结构

4．3．4 系统进化分析

4．3．5 EaBAFF在mRNA水平的表达分布

4．3．6 EaBAFF蛋白基本性质信息学分析

4．3．7 疏水性分析

4．3．8 结构功能域分析

4．3．9 EasBAFF蛋白的表达、纯化及鉴定

4．3．10 EasBAFF蛋白与青石斑鱼淋巴细胞和小鼠B淋巴细胞的结合

4．3．11 EasBAFF蛋白对青石斑鱼淋巴细胞和小鼠B淋巴细胞的促存活作用

4．4 讨论

第五章 斑马鱼LIGHT基因克隆表达

5．1 实验材料

5．1．1 实验动物、质粒、宿主菌

5．1．2 试剂耗材

5．1．3 主要实验仪器

5．2 实验方法

5．2．1 斑马鱼LIGHT基因克隆

5．2．2 生物信息学分析

5．2．3 Real-time PCR检测LIGHT的组织分布

5．2．4 表达载体pSUMO-zsLIGHT的构建

5．2．5 SUMO-zsLIGHT在大肠杆菌中的表达、鉴定及纯化

5．2．6 重组蛋白SUMO-zsLIGHT肿活性鉴定

5．3 实验结果与分析

5．3．1 斑马鱼LIGHT编码区全长cDNA序列及对应的氨基酸序列

5．3．2 zLIGHT氨基酸序列的同源比对分析

5．3．3 蛋白空间结构

5．3．4 系统进化分析

5．3．5 zLIGHT在mRNA水平的表达分布

5．3．6 zLIGHT蛋白基本性质信息学分析

5．3．7 疏水性分析

5．3．8 跨膜区分析

5．3．9 zLIGHT蛋白的表达、纯化及鉴定

5．3．10 SUMO-zsLIGHT蛋白与斑马鱼淋巴细胞和小鼠T淋巴细胞的结合

5．3．11 SUMO-zsLIGHT对小鼠T细胞的刺激

5．4 讨论

全文总结

参考文献

在读期间发表的学术论文及研究成果

致谢