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肝动脉化疗栓塞联合动脉内灌注促肝细胞生长素治疗兔VX2肝癌的实验研究

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摘要

目的：探讨肝动脉化疗栓塞联合促肝细胞生长素动脉内灌注治疗兔VX2肝癌的安全性及有效性。
　　 材料与方法：
　　 1.在B超引导下建立兔VX2肝癌模型，2周后PET/CT筛选出病灶直径1-2cm左右的荷瘤兔作为实验对象。
　　 2.30只荷瘤兔随机分为实验组和对照组，实验组分单纯TACE组（A组：超液化碘化油0.2ml/Kg+顺铂1mg/Kg）、TACE+局部肝动脉促肝细胞生长素灌注组（B组：超液化碘化油0.2ml/Kg+顺铂1ml/Kg+pHGF0.1ml/Kg）。对照组（C组：肝动脉造影并灌注生理盐水2ml），每组均为10只VX2肝癌模型兔。
　　 3.观察指标：①介入干预后瘤兔的一般情况；②分别于术前1天及术后3、7、28天抽血检查谷丙转氨酶（ALT），肝细胞生长因子（HGF），比较干预前后ALT及HGF变化情况；③分别于术前1天及术后28天测量肿瘤最大直径和最小直径（超声），计算肿瘤体积及肿瘤体积增长率，观察肿瘤体积变化情况；④术后28天行PET/CT检查，观察肿瘤转移情况，比较各组转移率的差别。⑤术后28天完成上述指标观察后处死实验动物，行HE染色及免疫组化染色（抗CD34染色），计算肿瘤微血管密度（MVD）。
　　 结果：
　　 1.动物的一般情况；
　　 3组动物术后一周内均出现不同程度的嗜睡，精神萎，拒食，恶心等现象，以A组最明显。动物死亡情况：A、B两组各有2只瘤兔死亡，C组有3只瘤兔死亡，均在干预后7天内死亡，死亡后动物及时补充。到动物处死前，A组动物的体重下降最明显，与B、C组相比差异有显著性（P<0.05）。
　　 2.肿瘤生长情况；
　　 术后各组肿瘤体积、肿瘤体积增长率分别为A组：3.42±0.45cm3、316.77±82.44％；B组4.92±0.38 cm3、551.36±121.92％；C组8.11±0.52 cm3、818.70±3：231.27％。三组间两两相比肿瘤体积及肿瘤增长率差异均有统计学意义（P<0.05）。
　　 3.肿瘤转移情况；
　　 术后第28天行PET/CT观察转移情况，其中最常见的转移部位是肝（22例次），其次为淋巴结（19例次）和肺（14例次）。各组的转移率分别为：A组：70％（7/10）；B组=80％（8/10）；C组=100％（10/10）。肝、肺、淋巴结转移3组两两比较差异均无统计学意义（P>0.05）。
　　 4.HGF；
　　 干预前1天三组间血清HGF水平差异无统计学意义（P>0.05）。C组干预前后血清HGF水平差异无统计学意义（P>0.05）。A、B两组治疗后第3天血清HGF明显升高，分别为A=2.02+0.11ng/ml、B=4.63±0.75ng/ml；治疗后第7天A、B两组血清HGF逐渐下降，分别为A=1.87±0.10ng/ml、B=2.61±0.50ng/ml；术后3，7天三组HGF水平两两相比有明显的统计学差异（P<0.05），治疗后第28天A、B两组血清HGF水平基本恢复术前水平，分别为A=1.57±0.12ng/ml、B=1.56±0.08ng/ml。术后28天A、B、C三组HGF水平差异无统计学意义（P>0.05）。
　　 5.肝功能；
　　 干预前1天三组间血清ALT水平差异无统计学意义（P>0.05）。A、B两组血清ALT水平治疗后第3天分别为A=133.85±3.80μ/L、B=84.29±4.10μ/L；治疗后第7天分别为A=80.31±2.400μ/L、B=56.57±3.06μ/L；治疗后第28天分别为A=51.74±3.74μ/L、B=39.57±2.31μ/L；表现为先升高后逐渐下降。C组的血清ALT水平干预后持续升高。治疗后3、7、28天三组血清ALT水平两两相比差异均有统计学意义（P<0.05）。
　　 6.肿瘤血管生成；
　　 术后第28天选取肿瘤周边生长最旺盛的部分行石蜡包埋，计算各组肿瘤MVD（抗CD34染色，x200视野）分别为：A=75.97±11.46，B=85.34±4.90，C=63.88±10.04。差异有显著性（F=13.533 P=0.000），且A组与B组、A组与C组两两比较差异皆有显著性（P<0.05）。
　　 结论：
　　 1.TACE后血清HGF浓度显著升高，到7天逐渐下降，TACE后非肿瘤肝细胞增生可能是术后血清HGF水平升高的主要原因。
　　 2.TACE联合动脉内灌注促肝细胞生长素治疗兔VX2肝癌，可改善TACE术后的生存质量；明显改善TACE后肝功能的损伤。
　　 3.TACE联合动脉内灌注促肝细胞生长素治疗兔VX2肝癌，促进了TACE后新生血管生成及肿瘤体积的增长，但对TACE后肿瘤转移并无明显影响。

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