温度刺激和鳗弧菌感染对牙鲆Hsp90基因表达的影响

摘要

符号说明

文献综述

1 热休克蛋白的分类

2 Hsp90的结构及功能

2．1 Hsp90的结构和构象动态变化

2．2 Hsp90的主要功能

3 Hsp90的表达调控

4 Hsp90参与细胞凋亡

5 与Hsp90作用的蛋白

6 Hsp90的应用前景

7 研究目的和意义

研究一 Hsp90基因在不同发育期牙鲆的表达分布

1 材料与方法

1．1 试剂

1．2 主要仪器

1．3 牙鲆及实验处理

1．4 引物设计

1．5 牙鲆组织总RNA提取和cDNA的合成

2 结果

2．1 Hsp90基因mRNA在牙鲆中的表达分布

3 讨论

研究二 温度和鳗弧菌感染对牙鲆Hsp90基因表达的影响

1 材料与方法

1．1 试剂

1．2 主要仪器

1．3 温度处理及牙鲆组织采集

1．4 鳗弧菌感染及样品采集

1．5 引物设计

1．6 牙鲆组织总RNA提取和cDNA的合成

1．7 Real-Time PCR分析

2 结果

2．1 不同温度刺激1h对牙鲆Hsp90基因mRNA的表达

2．2 不同处理时间对牙鲆Hsp90基因mRNA的表达

2．3 牙鲆感染鳗弧菌后Hsp90基因的表达

3 讨论

研究三 牙鲆Hsp90α的原核表达

1 材料与方法

1．1 主要试剂和仪器

1．2 引物设计和合成

1．3 总RNA提取和RT-PCR

1．4 PCR扩增

1．5 pBAD／gⅢA-HSP90α重组载体构建

1．6 重组载体pBAD／gⅢA-Hsp90α的诱导表达

1．7 表达产物的SDS-PAGE检测及可溶性分析

1．8 重组蛋白的大量诱导表达及表达后的处理

1．9 重组蛋白Western Blot检测

2 结果

2．1 Hsp90α基因扩增

2．2 重组质粒pEASY-T1-Hsp90α的鉴定

2．3 重组质粒pBAD／gⅢA-Hsp90α的鉴定

2．4 Hsp90原核表达和SDS-PAGE检测结果

2．5 目的蛋白测定浓度

2．6 重组蛋白Western Blot检测

3 讨论

参考文献

结论

后续研究

致谢

攻读硕士学位期间发表论文

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