茶多糖对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞与脾淋巴细胞免疫功能的影响

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茶多糖（Tea polysaccharides，TPS）是一种受到广泛关注的天然植物多糖，提取自茶叶，是继茶多酚之后的又一重要的功能性成分。大量的研究表明，茶多糖具有降血糖降血脂、增强免疫、抗肿瘤、治疗糖尿病等作用。茶多糖的结构分析和生物活性研究，具有品种、地区的差异性，江西省婺源绿茶作为中国绿茶的代表，闻名中外，产量高，品质佳，取材方便，本研究即选择婺源粗老绿茶为研究对象，通过水提、醇沉、Sevage法除蛋白、冻干等过程，最终得到纯度>95％的TPS。前期大量实验研究表明，TPS具有降血糖血脂、调节免疫、抗肿瘤等生物活性，在已有研究的基础上，运用现代分子生物学、免疫学的理论知识和技术，从细胞、分子、基因水平等方面，探讨TPS对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞的免疫调节作用，为进一步了解TPS的免疫药理学作用提供理论依据。本研究的主要内容如下：
　　以免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象，探讨 TPS在体外对巨噬细胞功能的影响。结果发现，能够显著地增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能；上调活性氧NO的分泌；提高细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平进一步利用RT-PCR和Western Blot技术从细胞因子 mRNA水平、iNOS蛋白水平进行试验，探究TPS对细胞因子分泌水平和活性氧的释放是否在翻译、转录水平上进行调控的。RT-PCR法检测TPS刺激24 hr之后腹腔巨噬细胞内iNOS、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平，Western Blot法检测到iNOS蛋白表达显著增加，结果表明，TPS可以提高腹腔巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平，增加iNOS蛋白表达，从而表明TPS对腹腔巨噬细胞的活化作用，提示其对分泌iNOS、TNF-α、IL-1β的调节作用可能发生在基因转录和蛋白表达水平。
　　以免疫抑制小鼠脾淋巴细胞为研究对象，探究TPS在体外对脾淋巴细胞免疫功能的影响。结果发现，TPS可以显著促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞的体外增殖，还可与ConA共同发挥协同作用，促进T淋巴细胞的增殖，但对LPS诱导的B淋巴细胞的增殖无显著影响；TPS显著提高T淋巴细胞CD3+、CD4+的百分率，提高CD4+/CD8+的比值，从而抵抗环磷酰胺引起的免疫抑制；TPS可显著促进Th1细胞分泌细胞因子IL-2，Th2细胞分泌IL-4，还可促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞分泌NO的能力，这表明TPS具有调节免疫功能的作用。
　　上述研究表明，TPS具有调节机体免疫的生物活性，对两大免疫细胞有显著的免疫调节作用，但是其具体的免疫调节机制还需进一步的研究。

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作者
冯燕玲;
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作者单位

南昌大学;

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授予单位南昌大学;
学科营养与食品卫生学
授予学位硕士
导师姓名谢明勇,黄丹菲;
年度 2015
页码
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类中药实验药理;
关键词
茶多糖; 免疫抑制; 原代腹腔巨噬细胞; 脾淋巴细胞; 生物活性; 动物模型;

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