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铁皮石斛水提物对糖尿病小鼠血糖和肠道菌群的影响

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前言

材料与方法

1 实验材料

1.1 主要仪器

1.2 主要试剂

1.3主要溶液及试剂的配制

1.4 实验动物

2. 实验方法

2.1 铁皮石斛水提物的制备[9-10]

2.2 模型制备[11-12]

2.3 实验动物分组和治疗处理[13-14]

2.4 检测指标

2.5 小鼠肠道菌群分析 [15-16]

2.6 统计学处理

结果

3.1 一般情况、体重、组织成分比例

3.2石斛水提物对血糖的影响

3.3 血清TC、TG、HDL的含量

3.4 肝组织SOD和MDA含量

3.5 肠道菌群PCR-DGGE分析

讨论

结论

参考文献

综述：铁皮石斛的研究进展

硕士期间发表文章情况

致谢

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摘要

目的：研究人工培育的铁皮石斛水提取物，对链脲霉素（STZ）所致的高血糖小鼠血糖、血脂、机体的脂肪和肌肉组织成分比例和肝脏抗氧化能力的影响，分析对肠道菌群影响。通过多种途径分析高血糖对机体的影响，以及铁皮石斛水提物对机体的保护作用和可能的机制。
　　方法：腹腔注射 STZ，制备小鼠糖尿病模型。实验分为铁皮石斛水提物高、中、低剂量组、正常对照组、模型对照组、阳性药物组。观察实验动物的一般情况，记录小鼠体重，用核磁共振仪测定小鼠机体组织成分比例，用血糖试纸测空腹血糖值，血清 TC、TG、HDL值按照试剂盒说明检测，利用分光光度计测肝脏SOD含量（黄嘌呤氧化酶法）、TBA法测MDA含量，通过PCR-DGGE凝胶电泳，quantity one软件分析小鼠肠道菌群多样性。
　　结果：（1）正常对照组小鼠在整个实验过程中，生长情况良好，没有死亡现象。成模小鼠精神不振、反应慢、不爱活动，每日喝水量增加，排尿次数明显增加、体重明显下降（P<0.05）、毛发松驰无光泽、好激怒、粪便变小，变黄且发干，模型对照组存活状态最差，存活率仅为50%。石斛水提物三个剂量组和阳性药物组小鼠的一般状态均明显改善，毛色和精神状态有所恢复，饮水量和尿量减少，粪便着色变深，存活率分别为80%、60%、60%、80%。模型对照组机体脂肪与肌肉的比例：正常对照组小鼠，随体重的增加，脂肪组织明显增加，明显高于其他各组，脂肪组织所占比例＞肌肉组织。模型对照组小鼠，随体重的下降，脂肪组织也减少，与其他各组相比有很大差别，脂肪组织所占比例＜肌肉组织。石斛水提物三个剂量组及阳性药物组，脂肪组织的变化与体重的变化一致，不论是脂肪组织的占比例还是肌肉组织所占比例均高于模型组，并且肌肉组织所占比例高于正常对照组。（2）与正常对照组比较，模型对照组血糖水平显著上升，在建模第28d后开始下降，3个石斛水提物组血糖水平在第7d起与模型对照组比有所减少，14~28d减少更加明显，差异有显著性（P<0.01），这一结果与阳性药物组的血糖的变化一致，并且各组彼此没有显著差异（P>0.05）。（3）建模28d后，与正常对照组比较，模型对照组小鼠血清TC、TG含量明显高于正常对照组小鼠（P<0.05），HDL低于正常对照组（P<0.05）。与模型对照组比较，石斛水提物三个剂量组和阳性药物组的血清TC含量明显减少（P<0.05），HDL含量明显增加（P<0.05）。石斛低剂量组、阳性药物组TG含量低于模型对照组（P<0.05），石斛中、高剂量组的血清TG含量高于模型对照组（P<0.05）。（4）与正常对照组比较，模型对照组小鼠肝组织SOD活性显著降低（P<0.05），MDA水平显著上升（P<0.01）。与模型对照组比，三个剂量石斛水提物的肝组织 SOD活性均明显升高、MDA含量均减少（P<0.05）；阳性药物组SOD活力有所增加（P<0.05），但是MDA含量高于模型对照组小鼠。（5）与正常对照组比较，阳性药物组和模型对照组粪便中菌群条带模糊不清，细菌表达量较低。石斛水提物中、高剂量组菌群多样性好且表达量较高。聚类分析结果表明，石斛水提物低、中剂量组为一簇，菌群相似度最高，石斛高剂量组、模型对照组，阳性药物组和正常对照组为一簇，菌群相似度高，其中阳性药物组与正常对照组菌群高度相似，石斛水提物治疗组中以高剂量组的菌群与正常对照组最为相似。以上结果表明，铁皮石斛水提物中、高剂量均能改善糖尿病小鼠的肠道菌群数量和多样性，在提高菌群数量上比阳性药物作用效果好。
　　结论：（1）石斛水提物能够改善糖尿病小鼠机体的健康情况和体重急剧下降的并发症；（2）石斛水提物对STZ诱导的糖尿病小鼠有显著的降血糖功效，和阳性药物（盐酸二甲基双胍）效果相差不多；（3）石斛水提物能调节STZ糖尿病小鼠机体脂肪与肌肉组织的比例，提示其可能调节了机体脂代谢，从而影响血糖水平；（4）石斛水提物能够调节糖尿病导致的TC、TG升高、HDL降低，改善糖尿病小鼠的血脂混乱；（5）石斛水提物能够通过升高糖尿病小鼠肝组织SOD活性、降低MDA水平，来增强肝脏抗氧化能力；（5）石斛水提物能够调节糖尿病所导致小鼠肠道菌群失调、菌群数量减少。综上所述，铁皮石斛水提物通过调节机体血脂、肝脏抗氧化能力和肠道菌群，改善了糖尿病小鼠的脂代谢，增强机体免疫能力，进而间接调节了血糖水平的稳定。所以，人工培育的铁皮石斛可以作为治疗糖尿病的辅助药物，能够降低血糖水平及改善糖尿病所导致的部分并发症，为未来糖尿病的预防和治疗提供新思路。

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