动物胆碱酯酶的制备及其在有机磷农药残留快速检测中的应用

声明

摘要

第一章 前言

1.1农药残留状况

1.1.1农药残留现状

1.1.2农药残留的产生原因及其危害

1.2有机磷农药残留检测技术的研究现状

1.2.1有机磷农药残留常规检测技术

1.2.2有机磷农药残留快速检测技术

1.3酶抑制法快速检测农药残留的研究现状

1.3.1酶抑制法检测的原理

1.3.2酶抑制法研究现状

1.4课题的研究目的与主要内容

1.4.1研究目的和意义

1.4.2研究内容

第二章 材料与方法

2.1主要试验材料

2.2主要试验仪器

2.3试验方法

2.3.1不同来源的粗酶液的提取

2.3.2胆碱酯酶的分离纯化方法

2.3.3胆碱酯酶活性的测定和蛋白质含量测定

2.3.4动物中胆碱酯酶纯度的电泳鉴定及酶分子量的测定

2.3.5胆碱酯酶的酶学性质测定

2.3.6胆碱酯酶保存形式的筛选

2.3.7酶粉的研制及其保存条件的研究

2.3.8酶粉用于农药残留的检测方法

第三章 结果与分析

3.1酶原的筛选

3.1.1不同动物来源的胆碱酯酶粗酶液的酶活力比较

3.1.2不同动物来源的胆碱酯酶粗酶液的耐藏性比较

3.1.3不同动物来源的胆碱酯酶粗酶液的综合比较

3.2胆碱酯酶粗酶液分离纯化方法的筛选

3.2.1硫酸铵盐析粗酶液的饱和度的确定

3.2.2胆碱酯酶的分离纯化

3.2.3胆碱酯酶的酶学性质研究

3.2.4胆碱酯酶酶促反应条件的优化

3.2.5杀虫剂对胆碱酯酶抑制中浓度(I50)的测定结果

3.3胆碱酯酶保存方式的筛选

3.3.1粗酶液和纯化后酶液耐藏性的比较

3.3.2酶粉的制备方法的确定

3.3.3酶液和酶粉的保藏性比较

3.3.4包装材料的确定

3.4胆碱酯酶制剂在蔬菜中有机磷农药残留快速检测中的应用

3.4.1酶粉制剂适宜检测条件的确定

3.4.2不同处理的酶制剂对敌敌畏农药检测结果的比较

3.4.3方法准确度、精密度和最低检出浓度的确定

3.4.4酶抑制分光光度法在不同种类蔬菜上的适用情况

3.4.5市场抽样调查四种蔬菜的有机磷农药残留情况

第四章 讨论

4.1有机磷类农药的中毒机制及影响毒性大小的因素

4.2本文在胆碱酯酶性质方面的研究特点

4.3酶抑制分光光度法快速检测蔬菜中有机磷农药残留的关键

4.4酶抑制分光光度法需要进一步研究的问题

第五章 结论

参考文献

附录

致 谢

攻读学位期间发表的学术论文