喉癌组织中MKRN1和HSP90基因表达的研究

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前言目前研究发现，端粒酶活性在大多数永生细胞及肿瘤细胞中表达增强，与肿瘤的发生有着密切的关系。端粒酶由端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase，hTERT)、端粒RNA(telomeraseRNA)和端粒相关蛋白1(TP1)组成。其中hTERT是调控端粒酶活性和端粒长度的主要因素，在细胞永生化和恶性转化中起关键作用。hTERT的功能受诸多因素的影响，MKRN1(MakorinRINGfingerprotein1，MKRN1)基因的编码产物是hTERT降解过程中的关键酶，MKRN1基因的过表达可促进hTERT的降解，降低端粒酶的活性和端粒的长度。热休克蛋白90(heatshockprotein90，HSP90)能够与hTERT结合并促进其活性，使端粒增长，抑制Hsp90的功能将促进端粒酶降解。在正常细胞中MKRN1和HSP90基因的表达保持动态平衡，端粒酶活性和端粒长度受这一平衡的调节。目前MKRN1和HSP90基因与肿瘤发生的相关性，以及二者相互作用还不十分清楚。因此，本实验检测MKRN1和HSP90基因在喉鳞状细胞癌(以下简称喉癌)组织及癌旁正常对照组织中的表达，以探讨MKRN1和HSP90基因的相关性及二者在喉癌发生发展中的作用。实验方法1.材料1.135例喉癌组织标本来源于中国医科大学附属第一临床学院耳鼻喉科手术切取标本。术前未经化疗或放疗，术后经病理证实均为鳞状细胞癌。 1.2总RNA提取相关试剂。 1.3RT-PCR相关试剂。 2.方法：分别取喉癌及癌旁正常对照组织约100mg，提取总RNA，选取OD260/OD280＞1.8的样品用于反转录合成cDNA，再以cDNA为模板以β-actin为内对照分别扩增MKRN1和HSP90基因，取10μlPCR产物经1.5％琼脂糖凝胶电泳，并在GelScan2Xl凝胶图像成像仪上扫描，以DNAMarkerDL2000为标准记录各特异性cDNA扩增带密度，以目的基因的cD-NA扩增片段密度与相应的内参照β-actin扩增片段密度的比值作为其mRNA表达水平的定量指标。数据采用SPSS10.0统计软件包进行统计分析。结果1.35例喉癌中有18例MKRN1基因mRNA表达下调，占51.4％(18/35)，16例HSP90基因mRNA表达上调，占45.7％(16/35)。MKRN1基因在喉癌组织中的表达水平低于癌旁正常对照组织(P＜0.01)，HSP90基因在喉癌组织中的表达高于癌旁正常对照组织(P＜0.05)，差异均有显著性。 2.MKRN1和HSP90基因的表达水平呈负相关r=-0.458(P＜0.05)。 3.MKRN1的表达与喉癌的分期和转移以及患者的年龄无关(P＞0.05)，HSP90基因与喉癌的病理分期和患者年龄相关(P＜0.05)，与喉癌的转移无关(P＞0.05)。结论MKRN1基因表达下调和HSP90基因过表达在喉癌组织中同时存在且具有相关性，二者之间的表达失衡可能在喉癌的发生发展中起重要的作用。

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作者
王淑云;
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作者单位

中国医科大学;

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授予单位中国医科大学;
学科遗传学
授予学位硕士
导师姓名李福才;
年度 2006
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类喉肿瘤;
关键词
喉鳞状细胞癌; HSP90基因; 基因表达;

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