弱激光照射对大鼠正畸移动牙牙周破骨细胞分化及PI3K/Akt通路影响的研究

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目的：
　　通过建立大鼠正畸牙移动模型，研究弱激光促进牙齿移动的分子生物学机制，为弱激光的临床应用提供理论依据。
　　方法：
　　1.选取48只健康雄性Wistar大鼠（250±15g），6周龄。将大鼠上颌的左右侧随机分为：空白组(n=6)，对照组（只加力,n=30），实验组1(加力+激光照射5s,n=30),实验组2(加力+激光照射10s,n=30)。
　　2.建立改良的大鼠正畸牙移动模型:在全麻下，在大鼠上颌牙两侧，分别用直径为0.2mm的结扎丝将0.008inch镍钛拉簧固定于前牙与第一磨牙之间，使用40g牵引力拉上颌第一磨牙向近中移动。为了防止镍钛拉簧脱落，在第一磨牙腭侧的结扎丝处使用光敏树脂加固。使用0.35mm的正畸丝环绕双侧中切牙弯制牵引圈并用光敏树脂固定为一整体，以增强支抗。
　　3.使用弱激光治疗仪在实验组的上颌第一磨牙的颊侧、腭侧和近中侧的粘膜处进行照射，加力后第0-6d每天照射1次；对照组只加力不照射；空白组既不加力也不照射。在1d、3d、5d、7d、14d时分别处死每组大鼠，并取包含第一磨牙及牙周组织的上颌骨块，包埋，制作组织切片。常规HE染色，光镜下进行压力侧破骨细胞计数；免疫组化方法分析压力侧破骨分化相关蛋白p-Akt阳性表达情况，使用使用Image-pro plus6.0图像分析软件评价积分光密度值(IOD)。
　　4.采用单因素方差分析(ANOVA)对各组破骨细胞数及p-Akt积分光密度值(IOD)的均数进行比较；使用LSD-t方法对多样本进行两两比较；采用Spearman秩相关方法分析p-Akt阳性表达量IOD值与破骨细胞数的相关性。P＜0.05，表示差异有统计学意义。
　　结果：
　　1.空白组HE和免疫组化染色结果：牙槽骨板边缘连续，牙周组织压力侧破骨细胞出现较少，细胞数目较少，少见p-Akt在破骨细胞内的阳性表达，细胞普遍蓝染。
　　2.破骨细胞数结果分析：3d，5d，,7d，14d时各组差异有统计学意义（P<0.05）。3d、5d时各组两两比较差异,均有统计学意义（P<0.05），且破骨细胞数由多到少排列为：5s组>10s组>对照组；7d时，对照组和10s组差异具有统计学意义（P<0.05），对照组>10s组；14d时，破骨细胞数较7d时减少，对照组与激光照射组（5s组、10s组）相比差异均具有统计学意义（P<0.05），对照组>5s组，对照组>10s组。5s组与10s组间差异无统计学意义（P>0.05）。
　　3.p-Akt阳性表达量结果分析：3d，5d，,7d，14d时各组差异有统计学意义（P<0.05）。3d、5d时各组两两比较差异都有统计学意义（P<0.05），由高到低依次为：5s组>10s组>对照组；7d时，各组两两比较差异均有统计学意义（P<0.05），由高到低依次为：对照组>5s组>10s组；14d时，对照组与激光照射组（5s组、10s组）相比差异均具有统计学意义（P<0.05），对照组>5s组，对照组>10s组；5s组与10s组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。
　　4.p-Akt阳性表达的 IOD值和破骨细胞数的相关性分析结果:相关系数r=0.897,F=378.111，P<0.01，说明p-Akt的阳性表达量与破骨细胞数两者有相关性，且呈正相关。
　　结论：
　　1.弱激光照射能够促进压力侧破骨细胞的分化。
　　2.PI3K／Akt信号通路参与了正畸牙移动过程中破骨细胞的分化过程。
　　3.弱激光可通过活化PI3K/Akt信号通路促进破骨细胞的分化。
　　4.5s组（能量密度15.92J/cm2）的弱激光照射能够更显著促进破骨细胞的活化。

著录项

作者
孙娜;
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作者单位

青岛大学;

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授予单位青岛大学;
学科口腔医学(口腔正畸学)
授予学位硕士
导师姓名刘珺;
年度 2015
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类口腔正畸学;
关键词
弱激光照射; 牙移动; 破骨细胞; 细胞分化; PI3K/Akt通路;

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