Apaf-1基因启动子甲基化与抑凋亡蛋白Apollon表达在成人急性白血病发生发展中的意义

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第一部分
　　目的:通过对成人急性白血病Apaf-1基因启动子甲基化状态的研究，深入了解抑癌基因沉默在白血病发生发展中的意义。
　　方法:初治急性非淋巴细胞白血病(AML)28例，初治急性淋巴细胞白血病10例，复发15例，为2009年3月至2009年10月在山东大学千佛山医院血液科住院和门诊患者。诊断标准参照张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》第三版，用甲基化特异性PCR法(MSP)测定Apaf-1基因启动子的甲基化状态，用RT-PCR检测研究对象白血病细胞Apaf-1表达水平，分析甲基化对Apaf-1表达水平的影响。统计学分析采用SPSS12.0软件包进行，结果用均数士标准差（x土s）表示，对计量资料t检验和方差分析，计数资料应用X2检验或fisher确切概率法。检验水准α=0.05。
　　结果:(1)正常对照组骨髓单个核细胞均未检测到Apaf-1基因启动子区域的甲基化，53例AL患者的甲基化阳性率33.9％(18/53)（图二），(p＜0.05），差异有统计学意义，即病人与正常人之间Apaf-1基因启动子区域CpG岛甲基化阳性率不同，初治AL患者中AML9例(32.1％)；ALL3例(30％)；复发6例(40％)，3者差异无统计学意义(P＞0.05)，即Apaf-1基因启动子区域CpG岛甲基化在AML患者、ALL患者与复发患者没有明显差异。10例对照组骨髓单个核细胞中只有1例表达缺失，其余均能检测到Apaf-1基因的表达，其中Apaf-1基因启动子区域发生甲基化的患者均未检测到该基因的表达，甲基化组较非甲基化组Apaf-1 mRNA表达水平下降，差异有统计学意义（p＜0.05）。实验组与对照组Apaf-1基因表达差异有统计学意义(p＜0.05)
　　结论: Apaf-1基因启动甲基化使基因表达降低或缺失，可能是白血病发病机制之一。
　　第二部分
　　目的:探讨Apaf-1基因启动子甲基化与Apollon蛋白表达的相互作用，深入了解两者在急性白血病发病发生发展中的相互作用。
　　方法:初治急性非淋巴细胞白血病(AML)28例，初治急性淋巴细胞白血病10例，复发15例，为2009年3月至2009年10月在山东大学千佛山医院血液科住院和门诊患者。诊断标准参照张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》第三版，用淋巴细胞分离液分离实验组和对照组骨髓单个核细胞，取50ul单个核细胞悬液涂片，采用免疫细胞化学法（ICC法）检测抑凋亡蛋白Apollon的表达情况，同时进行组织病理学评分。并将实验组进行疾病类型、外周血白细胞数分组与Apaf-1基因甲基化状态进行相关性分析。
　　结果:实验组骨髓单个核细胞Apollon蛋白表达水平高于对照组(P＜0.05)，而且在实验组中Apaf-1启动子存在甲基化的患者Apollon蛋白表达水平高于非甲基化患者，AL患者中Apaf-1基因启动子甲基化阳性率与Apollon蛋白表达呈正相关；外周血WBC＞10×109/L的AL患者Apaf-1基因启动子甲基化阳性率与蛋白表达水平高于WBC≤10×109/L患者(P＜0.05)，差异有统计学意义，
　　结论: Apaf-1基因启动子的异常甲基化与抑凋亡蛋白Apollon的高表达在白血病的发生发展中起协同作用，共同促进了白血病的发生、发展。

著录项

作者
郭军;
展开▼
作者单位

山东大学;

展开▼
授予单位山东大学;
学科血液病学
授予学位硕士
导师姓名朱传升;
年度 2011
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类急性白血病;
关键词
急性白血病; Apaf-1基因; 甲基化; 抑癌基因; 发病机制;

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