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超声波提取蓖麻碱工艺建立及蓖麻植株中蓖麻碱含量动态分析

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目录

摘要

缩略语表

1 前言

1.1 蓖麻碱研究概况

1.1.1 蓖麻碱毒理学研究

1.1.2 蓖麻碱药理学研究

1.1.3 蓖麻碱农药方面研究

1.2 蓖麻碱分离纯化方法

1.2.1 重结晶纯化

1.2.2 柱层析

1.3 蓖麻碱的结构鉴定

1.3.1 熔点测定

1.3.2 紫外光谱(UV)

1.3.3 红外吸收光谱法(IR)

1.3.4 质谱(MS)

1.3.5 核磁共振谱(NMR)

1.4 研究主要内容

1.5 本文研究目的和意义

2 试验材料

2.1 试验试剂

2.2 试验仪器

3 试验方法

3.1 蓖麻碱分离纯化及鉴定

3.1.1 蓖麻碱粗提物提取工艺

3.1.2 蓖麻碱纯化工艺

3.1.3 蓖麻碱鉴定分析

3.2 响应面分析法优化超声提取蓖麻碱工艺

3.2.1 超声波提取工艺

3.2.2 样品预处理

3.2.3 标准曲线的绘制

3.2.4 蓖麻碱提取率计算

3.2.5 超声提取单因素试验

3.2.6 响应面分析法试验设计

3.3 蓖麻植株中蓖麻碱含量动态变化

3.3.1 色谱条件

3.3.2 标准溶液的配制

3.3.3 标准曲线的绘制

3.3.4 样品的预处理

3.3.5 蓖麻碱含量测定

3.3.6 方法学考察试验

4 结果与分析

4.1 蓖麻碱分离纯化及鉴定结果分析

4.1.1 熔点测定结果分析

4.1.2 紫外光谱结果分析

4.1.3 红外光谱结果分析

4.1.4 液相色谱串联质谱分析

4.1.5 气相色谱串联质谱分析

4.2 响应面分析法优化超声提取蓖麻碱工艺

4.2.1 标准曲线的绘制

4.2.2 超声提取蓖麻碱单因素试验结果与分析

4.2.3 响应面试验结果与分析

4.3 蓖麻植株中蓖麻碱动态变化结果分析

4.3.1 精密度试验

4.3.2 稳定性试验

4.3.3 重复性试验

4.3.4 加样回收试验

4.3.5 蓖麻各器官中蓖麻碱含量

4.3.6 不同时间蓖麻叶中蓖麻碱的含量变化

4.3.7 不同时间蓖麻茎中蓖麻碱的含量变化

4.3.8 不同时期各器官中蓖麻碱含量

5 结论与讨论

5.1 结论

5.1.1 蓖麻碱分离纯化及鉴定

5.1.2 响应面优化超声波法提取蓖麻碱方法建立

5.1.3 蓖麻植株中蓖麻碱含量变化分析

5.2 讨论

5.2.1 蓖麻碱提取工艺分析

5.2.2 蓖麻各器官蓖麻碱含量随生长变化分析

5.2.3 高效液相对蓖麻植株中蓖麻碱含量测定

参考文献

致谢

作者简介

声明

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摘要

蓖麻碱是一种吡啶衍生类生物碱,存在于蓖麻整株植株中。本研究为探讨蓖麻植株中蓖麻碱提取方法及含量分布状态,建立一种针对于蓖麻鲜活组织,提取率高,工艺简单,经济有效的蓖麻碱的分离提取工艺。再采用高效液相色谱测定鲜活组织中蓖麻碱含量变化,为今后测定鲜活组织中蓖麻碱含量提供方便准确的技术手段。
  利用索氏提取法提取蓖麻碱,得到蓖麻结晶体。通过熔点仪测定熔点为200.8℃,紫外图谱吸收峰分别为219.00nm、254.80nm和314.00nm,红外图谱显示的官能团与蓖麻碱官能团基本一致。根据以上数据可证明该化合物为蓖麻碱。通过液-质联用、气-质联用等技术手段确定其纯度,色谱图显示为单一峰,其纯度为99.95%。即此方法提取到的蓖麻碱纯度较高,可作为纯品。
  以蓖麻叶为提取材料,采用超声波法提取蓖麻叶中蓖麻碱,将蓖麻叶用85%丙酮去除叶绿素,除去叶绿素对测定蓖麻碱含量的干扰。在单因素基础上,采用响应面优化超声波试验得到蓖麻碱最佳提取工艺条件:以甲醇为提取溶剂,时间128.4min、功率621.05W、料液比1∶22.3g/mL,提取率为2.63‰。
  以蓖麻叶、蓖麻茎、籽粒、籽粒壳为材料,采用超声波提取法进行提取,利用高效液相色谱对蓖麻植株中蓖麻碱的含量进行测定。通过试验确定色谱条件为:以DSHYPERSIL为色谱柱,检测波长:308nm,进样量:20μL,流动相:乙腈∶水=10∶90,流速:0.8mL/min,柱温:30℃。以峰面积为Y,浓度为X。得线性回归方程为:Y=1478.318X+10726.76,r=0.9998,该回归方程呈良好的线性关系。经过测定蓖麻叶中的蓖麻碱含量最高,其次是籽粒壳、茎。

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