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【6h】

玉米伏马毒素抗性筛查及储藏技术的研究

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目录

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符号说明

1前言

1.1伏马毒素概述

1.1.1伏马毒素

1.1.2伏马毒素的危害

1.1.3伏马毒素B1的检测方法

1.2青霉酸概述

1.2.1青霉酸主要特征

1.2.2青霉酸的生物合成

1.2.3青霉酸的毒性

1.2.4青霉酸的作用机制

1.2.5青霉酸检测方法

1.3玉米中伏马毒素B1、青霉酸污染的主要环节

1.3.1脱水干燥方式

1.3.2储藏模式

1.4本论文的研究内容及目的意义

1.4.1研究目的及意义

1.4.2研究内容

2材料与方法

2.1实验材料与主要试剂

2.2主要仪器

2.3实验方法

2.3.1种子抗性筛查法

2.3.2含水量测定、伏马毒素B1初步检测、快速提取-高效液相色谱-串联质谱检测法(QuEChERS-HPLC-MS/MS)建立

3结果与分析

3.1种子抗性筛查法

3.1.1玉米种子接种后不同时间的发病情况

3.1.2发病级别调查分析

3.2含水量、伏马毒素B1含量、青霉酸污染

3.2.1玉米样品含水量

3.2.2采用ELISA法初步检测样品中伏马毒素B1含量

3.2.3 QuEChERS-UPLC-MS/MRM法验证玉米中伏马毒素B1、检测青霉酸含量

4讨论

4.1玉米受真菌毒素污染的现状

4.2玉米中伏马毒素B1和青霉酸的污染防控

4.2.1筛选培育抗伏马毒素B1玉米新品种

4.2.2利用农业措施控制伏马毒素B1和青霉酸

4.2.3多种防控措施并行

4.2.4建立伏马毒素B1、青霉酸的产后防控策略

4.3展望

5结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文目录

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摘要

伏马毒素(Fumonisins,FB)是由串珠镰刀菌产生的一种具有毒性及致癌性的真菌毒素,在一定温度和湿度条件下产生的水溶性次级代谢产物,是一类由不同的多氢醇和丙三羧酸组成结构类似的双酯化合物。三种最常见的伏马毒素是伏马毒素B1,伏马毒素B2和伏马毒素B3,其中伏马毒素B1是伏马毒素B的主要组分,占伏马毒素B总量的70%~80%,毒性最强,能引起马脑白质软化症,猪肺水肿及大鼠肾及肝癌。青霉酸(Penicillic Acid,PA)是储藏真菌产生的生物毒素,其中青霉属产青霉酸的菌种最多,尤以圆弧青霉菌有毒代谢产物中含量较高。青霉酸存在于谷物中,主要污染玉米、高粱、大麦、小麦、燕麦等粮食作物。青霉酸对玉米安全影响很大,1974年检测美国玉米,其青霉酸含量为5~230mg/kg。可见,开展玉米真菌毒素防控技术研究对于保障中国粮食安全具有重要的现实意义。 本论文研究的目的是以山东主导玉米品种为原料,采用种子接种抗性筛查法,筛查出具有伏马毒素抗性玉米品种;应用液相色谱串联质谱快速检测方法测定伏马毒素B1和青霉酸含量,探明玉米不同脱水干燥方式、储藏模式下真菌毒素污染发生规律。 1、采用种子接种抗性筛查法,对不同的玉米品种进行伏马毒素抗性筛查。 针对镰刀菌致病机制,按照我省现有耕作栽培模式设计大田试验,以骨干玉米自交系自主育种资源、自主组配的优良杂交组合为研究对象,通过培养原代菌株、一代菌株、二代菌株,侵染玉米种子,开展种子抗性筛查,筛选出玉米伏马毒素抗性品种—DK517♂、超系9♂、华美1号♂、德美亚3号♂、15K010、15K011、15K012、15K013、15K021、15K023。 2、应用液相色谱串联质谱快速检测技术对山东省主导玉米品种主要真菌毒素(伏马毒素B1和青霉酸)开展研究,探明玉米不同脱水干燥方式、不同储藏模式下真菌毒素污染发生规律。 针对烘干、晾干、晒干、手动晾干四种脱水干燥方式,开展低温储藏、包装储藏两种储藏方式对鲁单2016、蠡玉16、齐单1号等23种山东省主导玉米品种进行储藏,3个月后,采用酶联免疫吸附试验检测法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)进行伏马毒素B1筛查;应用高效液相色谱-串联质谱技术,建立了快速提取-高效液相色谱-串联质谱检测的真菌毒素确证方法(QuEChERS-Ultra Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry/Multiple Reaction Monitoring)。研究表明,在烘干脱水干燥方式、低温4℃、PE覆膜和PE/PA真空包装储藏条件下,主导玉米样品中的FB1含量均低于最低限量标准;伏马毒素B1、青霉酸是玉米中最主要的污染毒素。

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