声明
符号说明
摘要
1 前言
1．1 卵母细胞染色质构型的概念
1．2 哺乳动物多同母细胞染色质构型的分类标准
1．3 卵母细胞染色质构型和基因转录的关系
1．4 卵母细胞染色质构型与发育能力的关系
1．5 卵母细胞组蛋白表观修饰与基因转录的关系
1．5．1 卵母细胞组蛋白乙酰化与基因转录的关系
1．5．2 卵母细胞组蛋白甲基化与基因转录的关系
1．5．3 卵母细胞组蛋白磷酸化与基因转录的关系
1．6 卵母细胞组蛋白表观修饰与发育能力的关系
1．7 不同处理与卵母细胞染色质构型和发育能力之间的关系
1．7．1 卵巢保存与卵母细胞染色质构型和发育能力之间的关系
1．7．2 其他处理与卵母细胞染色质构型和发育能力之间的关系
1．8 细胞凋亡与卵母细胞发育能力关系
1．8．1 颗粒细胞凋亡与卵母细胞发育能力关系
1．8．2 Fas／FasL通路与卵母细胞发育能力的关系
1．9 本研究的主要内容和目的意义
2 材料和方法
2．1 主要试剂及配制
2．2 实验动物饲养及小鼠超排处理
2．3 卵巢保存
2．4 18-19日龄小鼠卵母细胞的获取
2．5 GV期卵母细胞染色质构型观察
2．6 活细胞工作站观察异常染色质构型转变过程
2．7 小鼠卵丘细胞单层培养
2．8 卵母细胞获取和体外成熟
2．9 卵母细胞Sr2+激活和胚胎培养
2．10 卵母细胞核内组蛋白及Fas蛋白免疫荧光染色
2．11 Hoechst33342荧光染色检测颗粒细胞凋亡
2．12 Western Blot检测颗粒细胞FasL表达
2．12．1 western blot试剂及溶液
2．12．2 壁颗粒细胞蛋白的提取
2．13．3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
2．12．4 抗原抗体的结合及显色
2．13 数据分析
3 结果与分析
3．1 不同条件保存卵巢前后卵母细胞染色质构型分类
3．2 不同条件保存卵巢对卵母细胞染色质构型转变的影响
3．3 活细胞工作站下观察卯母细胞异常染色质构型转变的过程
3．4 不同条件保存卵巢对卯母细胞发育能力的影响
3．5 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白修饰的影响
3．5．1 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白乙酰化水平的影响
3．5．2 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白甲基化水平的影响
3．5．3 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白磷酸化水平的影响
3．6 不同条件保存卵巢对颗粒细胞凋亡、FasL表达水平的影响
3．6．1 不同条件保存卵巢对颗粒细胞凋亡的影响
3．6．2 不同条件保存卵巢对颗粒细胞FasL表达水平的影响
3．7 不同条件保存卵巢对卯母细胞Fas表达水平的影响
4 讨论
4．1 不同条件保存卵巢对卵母细胞染色质构型转变的影响
4．2 不同条件保存卵巢对卵母细胞发育能力的影响
4．3 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白表观修饰水平的影响
4．4 不同条件保存卵巢对颗粒细胞凋亡的影响
4．5 不同条件保存卵巢对颗粒细胞FasL表达水平和卵母细胞Fas表达水平的影响
5 结论
参考文献
致谢
作者简介以及发表论文
