不同作物光合特性比较及籽粒苋C4途径关键酶基因的原核表达

摘要

第一章 引言

1．1 籽粒苋国内外研究进展

1．2 植物的光合特性研究进展

1．2．1 光合作用日变化研究

1．2．2 影响光合作用因素

1．2．3 光合作用测定方法

1．3 C4光合途径研究进展

1．3．1 C4植物与C3植物光合作用比较

1．3．2 C4关键酶基因研究进展

1．4 本研究的目的意义

第二章 不同作物光合特性比较

2．1 材料和方法

2．1．1 实验材料

2．1．2 实验方法

2．2 结果与分析

2．2．1 净光合速率日变化研究

2．2．2 光合速率对光合有效辐射的响应

2．2．3 光合速率对温度的响应

2．3 讨论

第三章 C4关键酶PEPC基因在籽粒苋基因组中的拷贝数分析

3．1 材料和方法

3．1．1 实验材料

3．1．2 实验方法

3．2 结果与分析

3．2．1 籽粒苋基因组DNA质量检测

3．2．2 PCR扩增获得籽粒苋PEPC基因片段

3．2．3 DIG标记效率检测

3．2．4 籽粒苋基因组中PEPC基因拷贝数分析

3．3 讨论

第四章 籽粒苋C4关键酶PEPC和NAD-ME基因的原核表达

4．1 实验材料

4．1．1 菌株和质粒

4．1．2 酶和试剂

4．1．3 主要溶液的配制

4．1．4 引物设计与合成

4．2 实验方法

4．2．1 籽粒苋PEPC基因的克隆

4．2．2 籽粒苋NAD-ME基因的克隆

4．2．3 目的基因片段的回收

4．2．4 克隆反应体系的建立

4．2．5 质粒提取

4．2．6 阳性重组子的鉴定和测序

4．2．7 转化Transetta(DE3)感受态细胞

4．2．8 PEPC和NAD-ME基因的原核诱导表达

4．2．9 PEPC和NAD-ME基因表达产物SDS-PAGE电泳分析

4．3 结果与分析

4．3．1 籽粒苋PEPC和NAD-ME基因的克隆

4．3．2 pEASY-E1-PEPC和pEASY-E1-(NAD)-ME原核表达载体的构建

4．3．3 重组原核表达载体pEASY-E1-PEPC的验证

4．3．4 重组原核表达载体pEASY-E1-(NAD)-ME的验证

4．3．5 重组质粒转化菌株Transetta(DE3)的PCR检测

4．3．6 原核表达和SDS-PAGE凝胶电泳

4．4 讨论

第五章 结论

5．1 实验总结

5．2 进一步研究计划

参考文献

攻读学位期间取得的研究成果

致谢

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