PPARγ激动剂对RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量及ABCG1、LXRα表达的影响

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目的：
　　通过体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞，诱导分化建立泡沫细胞模型，然后测定PPARγ激动剂盐酸吡格列酮(pioglitazone hydrochloride，PG)对泡沫细胞内胆固醇含量及ABCG1、LXRα表达的影响，旨在初步探究PG对泡沫细胞内胆固醇含量的调控机制。
　　方法：
　　1.体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞，再用50mg/L ox-LDL孵育48h，最后以油红O染色并在光镜下观察细胞形态及变化。
　　2.以不同浓度的PG(对照组0μmol/L、实验组5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用泡沫细胞24h后，酶比色法测定泡沫细胞内胆固醇酯（Cholesterol Ester，CE）的含量；以30μmol/L的PG作用泡沫细胞不同时间(对照组Oh、实验组6h、12h、24h、48h)后，酶比色法测定泡沫细胞内CE的含量。
　　3.将诱导分化好的RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞，给予不同浓度的PG(对照组0μmol/L、实验组5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用24h后，RT-PCR和Western blot分别测定ABCG1、LXRα的基因及蛋白表达水平。
　　结果：
　　（1）体外培养的RAW264.7小鼠巨噬细胞半贴壁生长，主要呈类圆形和不规则多边形，细胞体积较小，含1-2个核，有伪足伸出，经50mg/L ox-LDL孵育48h后，细胞体积显著变大，油红O染色胞质内可见大量红染脂滴。
　　（2）与对照组相比，不同浓度的PG干预RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞24h后，细胞内的CE含量均显著减少，差异有统计学意义（P<0.01）；与对照组相比，30μmol/LPG作用RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞0h、6h、12h、24h、48h后，细胞内的CE含量均显著减少，差异有统计学意义（P<0.01）。（3）与对照组相比，不同浓度PG组巨噬细胞ABCG1、LXRα的mRNA及蛋白的水平呈浓度依赖性增高，差异有统计学意义（P<0.01）。
　　结论：
　　1.PPARγ激动剂可减少RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量，并呈浓度和时间依赖性。
　　2.PPARγ激动剂可呈浓度依赖性增加小鼠RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞内ABCG1、LXRα的mRNA及蛋白表达。
　　3.PPARγ激动剂减少泡沫细胞内胆固醇酯的含量可能是通过上调ABCG1、LXRα的表达来实现的，此机制介导的胆固醇流出将成为改善AS的主要途径之一。

著录项

作者
赵婷婷;
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作者单位

山西医科大学;

展开▼
授予单位山西医科大学;
学科内科学
授予学位硕士
导师姓名王庸晋,王治平;
年度 2015
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类病理生理学;
关键词
巨噬细胞; 诱导分化; 泡沫细胞; PPARγ激动剂; 盐酸吡格列酮; 胆固醇酯;

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