黑素体特异性蛋白GPNMB在黑色素形成中的作用探讨

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黑色素代谢过程是色素性皮肤病及皮肤美白领域研究热点。皮肤中的色素是由黑色素细胞产生的,因此,美白的关键在于抑制黑色素细胞产生黑色素的能力。传统的观点认为抑制黑色素产生的关键在于抑制黑色素合成过程的关键酶酪氨酸酶(Tyr)的活性。随着人们对黑色素合成机理认识的深入,人们已经能够从多个靶位点出发抑制黑色素的形成。近年来,一些新型的如非转移性黑色素瘤糖蛋白 B[glycoprotein(transmembrane) nonmetastatic melanoma protein b,GPNMB]等黑素体特异性蛋白被发现,但是它们在黑色素代谢中的作用尚不清楚。本课题拟探讨GPNMB在黑色素形成中的作用。
　　目的:明确UVB对GPNMB表达的调变规律,利用SiRNA法干扰GPNMB后判断其在黑色素形成中的作用,并初步探讨其可能机理。
　　方法:以 GPNMB为研究对象,将 Tyr作为阳性对照,通过对黑色素上皮细胞系PIG1进行UVB照射,分别利用实时定量RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术,了解对GPNMB的变化规律;合成GPNMB特异性SiRNA并转染入PIG1细胞中,利用Western blot判断其抑制GPNMB表达的效率,利用电镜观察黑素细胞中黑素体结构及分布的变化;利用实时定量RT-PCR和Western blot判断当GPNMB表达受抑制后,Tyr在基因和蛋白水平的变化;利用实时定量RT-PCR,分析小眼球转录因子(microphthalmia-associated transcription factor, MITF)及受MITF调控的黑素体特异性蛋白Trp1和 OA1的表达变化。
　　结果:(1)GPNMB可以被UVB上调,变化趋势与Tyr相近;(2)GPNMB表达被抑制后,黑素体形成减少,同时 Tyr的基因及蛋白表达水平都降低;(3)在对MITF及其调节蛋白的研究中,发现UVB和GPNMB的下调都能够上调MITF表达,而当UVB和GPNMB下调同时发生时,MITF水平急剧下降。
　　结论:1.GPNMB能够被UVB上调;2.GPNMB的表达被抑制后,黑素体生成减少,酪氨酸酶合成下降;3.GPNMB被抑制后黑素体减少的原因可能与MITF调控途径不同。

著录项

作者
张萍;
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作者单位

第四军医大学;

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授予单位第四军医大学;
学科临床医学;皮肤病与性病学
授予学位博士
导师姓名刘玮;
年度 2013
页码
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类皮肤肿瘤;
关键词
黑色素; 黑素体特异性蛋白; SiRNA法; 抑制作用;

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