摘要
英文缩略词表
文献综述
1 前言
2 Hsp70与雄性生殖
2．1 Hsp70概述
2．2 Hsp70对雄性生殖的影响
3 热应激对睾丸的影响
4 大肠杆菌表达系统
4．1 大肠杆菌融合表达载体
4．2 Lac表达系统
4．3 外源基因在大肠杆菌中的表达
4．4 大肠杆菌表达系统的特点
试验一 小鼠睾丸hsp70-2基因的克隆与原核表达
1 试验材料
1．1 试验动物
1．2 主要试剂
1．3 主要仪器设备
1．4 菌株和载体
2 试验方法
2．1 引物的设计与合成
2．2 小鼠睾丸hsp70-2基因的扩增与回收
2．3 小鼠睾丸hsp70-2基因原核表达载体的构建与鉴定
2．4 序列测定与分析
2．5 hsp70-2基因在E．coli BL21中的表达及表达条件的优化
2．6 重组蛋白免疫印迹分析(Western blot)
2．7 表达的融合蛋白的纯化
3 试验结果
3．1 PCR扩增结果
3．2 小鼠睾丸hsp70-2基因原核表达载体的鉴定结果
3．3 测序结果分析
3．4 hsp70-2基因在E．coli BL21申的表达及表达条件的优化
4 讨论
试验二 小鼠睾丸hsc70t基因的克隆与序列分析
1 试验材料
2 试验方法
2．1 引物的设计与合成
2．2 小鼠睾丸hsc70t基因的序列的扩增
2．3 阳性重组质粒的克隆和鉴定
2．4 分子进化分析
2．5 抗原表位的预测
2．6 跨膜区的预测
3 试验结果
3．1 目的基因的扩增
3．2 单菌落PCR结果
3．3 质粒PCR鉴定
3．4 测序结果
3．5 同源性比较及亲缘进化树分析
3．6 抗原表位的预测
3．7 跨膜区的预测
4 讨论
试验三 热应激对小鼠睾丸特异性hsp70基因mRNA转录水平的影响
1 试验材料
1．1 试验动物
1．2 主要试剂与仪器
2 试验方法
2．1 小鼠总RNA的提取
2．2 RT-PCR检测
2．3 hsp70-2和hsc70t基因片段的克隆与序列分析
2．4 灰度扫描与数据分析
3 试验结果
3．1 hsp70-2和hsc70t RT-PCR扩增结果
3．2 hsp70-2和hsc70t基因片段克隆的鉴定结果
3．3 测序结果
3．4 热应激小鼠睾丸组织特异性hsp70 mRNA转录的半定量分析
4 讨论
结论
参考文献
致谢
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
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