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UPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS在乳制品质量安全方面的应用研究

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UPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS在乳制品质量安全方面的应用研究

摘 要

ABSTRACT

1 绪论

1.1 课题背景

1.1.1 乳及乳制品简介

1.1.2 乳及乳制品安全现状

1.2 兽药及非法添加物质检测现状

1.2.1 抗生素类兽药检测现状

1.2.2 那非类物质检测现状

1.2.3 舒巴坦(不可逆的竞争性β-内酰胺酶抑制剂)检测现状

1.3 前处理方法的研究进展

1.3.1 固相萃取(Solid-Phase Extraction,简称SPE)

1.3.2 基质固相分散萃取(matrix solid-phase dispersion,MSPD)

1.3.3 分散微固相萃取(Dispersed microsolid phase extractio

1.3.4 QuEChERS(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、S

1.3.5 凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography,GPC)

1.3.6 微波辅助萃取(Microwave-Assisted Extraction,MAE)

1.3.7 加速溶剂萃取(Accelerated Solvent Extraction,ASE)

1.4 色谱检测技术的研究进展

1.4.1 气相色谱法(GC)

1.4.2 气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)

1.4.3 液相色谱法(LC)

1.4.4 超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用技术(UPLC-MS/MS)

1.4.5 超高效液相色谱/四极杆-飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS)技术

1.4.6 超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q Exactive Or

1.5 方法学验证

1.5.2 方法的准确度

1.5.3 方法的精密度

1.5.4 校准曲线

1.6 研究意义与内容

1.6.1 研究内容

1.6.2 研究意义

2.1 引言

2.2 实验部分

2.2.1 仪器、试剂与材料

2.2.2 标准溶液的配制

2.2.3 样品前处理

2.2.4 仪器条件

2.3 结果与讨论

2.3.2 净化方法的优化

2.3.3 色谱条件的优化

2.3.4 质谱条件的优化

2.3.5 基质效应的考察

2.3.6 方法学验证

2.3.7 实际样品的测定

2.4 本章小结

3 新型固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱测定羊奶中非法添加的11种磷酸二酯酶-5抑

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 仪器、试剂及材料

3.2.3 质谱条件

3.2.4 标准溶液配制

3.2.5 样品的前处理

3.3 结果与讨论

3.3.1 色谱条件的优化

3.3.2 提取剂的选择

3.3.3 净化方法的选择

3.3.4 基质效应的考察

3.3.5 方法学验证

3.3.6 实际样品的测定

3.4 本章小结

4.1 引言

4.2 实验部分

4.2.1 仪器与材料

4.2.2 溶液的配制

4.2.3 样品处理

4.2.4 UPLC-MS条件

4.3 结果讨论

4.3.1 提取溶剂的选择

4.3.2 净化方式选择

4.3.3 色谱条件的优化

4.3.4 高分辨质谱条件的优化

4.3.5 基质效应考察

4.3.6 方法学验证

4.3.7 实际样品测定

4.4 本章小结

5 结论

致 谢

参考文献

附录A

附录B

附录C

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摘要

乳制品的质量和安全将直接影响食品工业和人类健康的发展。国际上对其质量和安全的把控日益严格,为了进一步完善乳制品中质量安全检测方法体系,本论文采用新型固相萃取柱(Oasis? PRiME HLB)和超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS)技术,研究建立了乳制品中兽药残留、非法添加的磷酸二酯酶-5抑制剂及其类似物、舒巴坦的测定方法。研究工作如下: 1.建立了新型固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱快速检测分析乳制品中兽药多残留的方法。奶粉样品先用温水按一定配比复溶,液态乳样品直接处理,经含0.2%甲酸的乙腈溶液萃取并沉淀其中富含的大部分蛋白,Oasis? PRiME HLB固相萃取小柱净化处理,经Thermo Hypersll GOLD aQ色谱柱分离,乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,高分辨质谱Q-Exactive测定,外标法定量。结果表明,各分析物在一定的的范围内呈良好的线性关系,线性相关系数(r )均大于0. 9906。通过加标回收试验验证,牛奶和奶粉检出限分别为0.5 μg/kg、1 μg/kg,定量限分别为5 μg/kg、10 μg/kg,添加回收率为60.1%~139.4%,RSD为0.9%~15.9%。经过实际样品验证,该方法简便、可靠、准确、快速,可用于乳制品中兽药多残留的高通量定性筛查和定量。 2.采用新型固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱,建立了快速测定羊奶中违法添加的豪莫西地那非、那红地那非、红地那非、伐地那非、硫代艾地那非、氨基他达拉非、伪伐地那非、那莫西地那非、他达拉非、西地那非和羟基豪莫西地那非11种磷酸二酯酶-5抑制剂的高分辨质谱检测方法。羊奶经乙腈超声提取,Oasis? PRiME HLB固相萃取柱净化。以COSMOSIL Packed Column 5C18-MS-∥为色谱柱;0.1%甲酸-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 mL/min;ESI 正离子模式,以Orbitrap为检测器进行定性及定量分析。经方法学验证,本方法在0~50μg/L浓度范围内线性良好,各个化合物的回收率为62.1%~96.7%,RSD为1.6%~6.0%。本方法快捷、可靠、灵敏度高,可用于羊奶中非法添加的11种磷酸二酯酶-5抑制剂的快速筛查。 3.建立了新型固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱测定液态乳中舒巴坦的方法。液态乳采用乙腈超声萃取,Oasis? PRiME HLB固相萃取柱净化。以Thermo Hypersil Gold aQ(100 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱进行分离,在电喷雾负离子模式下(ESI-),对分辨率等参数进行优化,在全扫描模式下提取目标化合物的精确质量数,采取自主激发采集二级质谱图使定性的准确性得到进一步的提高。在0.5~10μg/L范围内,线性关系良好,方法的定量限为0.5μg/kg,回收率为82.1%~95.5%,相对标准偏差为3.5%~6.2%。该方法操作简单,测定结果可靠,可用于液态乳中舒巴坦残留的测定。

著录项

  • 作者

    付晓燕;

  • 作者单位

    陕西科技大学;

  • 授予单位 陕西科技大学;
  • 学科 食品科学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 朱振宝;
  • 年度 2018
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类
  • 关键词

    HRMS; 乳制品; 质量安全;

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