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鬼臼毒素对小菜蛾Plutella xylostella(L.)毒杀作用初步研究

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第一章文献综述

1.1砂地柏杀虫作用研究进展

1.1.1砂地柏杀虫化学成分研究概况

1.1.2砂地柏粗提物及活性单体的杀虫作用

1.1.3砂地柏杀虫活性物质作用机理

1.2鬼臼毒素及其类似物研究现状

1.2.1鬼臼毒素及其类似物医用研究进展

1.2.2鬼臼毒素及其类似物农用研究进展

1.3昆虫消化毒剂研究概况

1.4本研究的提出及论文设计思路

第二章材料与方法

2.1供试材料

2.1.1供试昆虫

2.1.2供试药剂

2.1.3主要仪器

2.2试验方法

2.2.1生物活性测定方法

2.2.2致毒症状观察方法

2.2.3解毒代谢酶活性测定方法

2.2.4中肠消化酶活性测定方法

2.2.5组织学观察方法

第三章结果与分析

3.1鬼臼毒素对小菜蛾的生物活性测定结果

3.1.1触杀活性测定结果

3.1.2拒食活性测定结果

3.1.3毒杀活性测定结果

3.1.4生长发育抑制作用测定结果

3.2鬼臼毒素对小菜蛾致毒症状

3.3鬼臼毒素对小菜蛾解毒代谢酶系活性的影响

3.3.1酯酶活性测定结果

3.3.2羧酸酯酶活性测定结果

3.3.3磷酸酯酶活性测定结果

3.3.4谷胱甘肽S-转移酶活性测定结果

3.3.5细胞色素P450O-脱甲基活性测定结果

3.4鬼臼毒素对小菜蛾中肠消化酶活性的影响

3.4.1淀粉酶活性测定结果

3.4.2脂肪酶活性测定结果

3.4.3蛋白酶活性测定结果

3.5组织学观察结果

3.5.1中肠组织切片观察结果

3.5.2中肠细胞超微结构观察结果

第四章问题与讨论

4.1鬼臼毒素杀虫活性强,作用方式多样,且作用谱广

4.2鬼臼毒素可能主要作用于小菜蛾消化系统

4.2.1小菜蛾中肠蛋白酶可能是鬼臼毒素的作用靶标之一

4.2.2中肠肠壁细胞可能是鬼臼毒素的主要作用靶标之一

4.3鬼臼毒素对小菜蛾代谢酶系有明显影响

4.3.1鬼臼毒素对小菜蛾的毒杀作用可能与其对碱性磷酸酯酶的抑制有关

4.3.2鬼臼毒素对酯酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和细胞色素P450酶系的激活可能是昆虫的一种应激反应

4.4鬼臼毒素开发应用前景广阔

4.5有待于进一步研究的问题

第五章小结

参考文献

致谢

作者简介

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摘要

鬼臼毒素是砂地柏Sabina vulgaris Ant.中的主要杀虫活性成分之一。前期研究结果表明,其对菜青虫Pieris rapae、粘虫Mythimna separata等多种害虫具有较好的生物活性。为进一步揭示鬼臼毒素的杀虫活性及作用机理,本论文以蔬菜害虫小菜蛾Plutella xylostella(L.)为试虫,对其生物活性、致毒症状及作用机理进行了初步研究,取得如下结果: 1.鬼臼毒素对小菜蛾具有较好的拒食、毒杀及生长发育抑制作用。其非选择性试验的AFC<,50>为0.2617 mg/ml(48h);LC<,50>为1.9061 mg/ml (72h);0.125mg/ml剂量下相对生长率比对照下降41.18%(48h),化蛹率为43.33%,不能正常羽化。 2.鬼臼毒素处理后的小菜蛾幼虫中毒症状表现缓慢。处理4h后开始出现零星取食现象,一部分试虫取食少量叶片后即停止取食,随后表现为活动能力下降,呈浅度麻痹状,触之可微动,不能复苏,体色逐渐变黄,最后缓慢死亡;而另一部分试虫多为间歇性取食,并会出现蜕皮异常现象,有的不能完全蜕去头壳,有的尾部难以蜕出,有的虽能正常蜕皮但化蛹异常。另外部分试虫中会出现脱肛、轻微抽搐等现象。 3.鬼臼毒素对小菜蛾幼虫体内各代谢酶系存在不同程度的影响。对酯酶、羧酸酯酶表现为先激活后抑制的作用;对酸性磷酸酯酶表现先抑制后激活的作用;对碱性磷酸酯酶活性具有明显的抑制作用,且随着处理时间的延长,抑制作用增强;对谷胱甘肽S-转移酶和细胞色素P<,450>酶系表现出先激活后抑制的影响。 4.鬼臼毒素对小菜蛾中肠消化酶具有明显影响。对淀粉酶有一定激活作用;对脂肪酶活性的影响表现为先激活,再逐渐恢复的变化过程;对蛋白酶活性具有显著的抑制作用。 5.组织学观察结果表明,鬼臼毒素对小菜蛾中肠肠壁细胞有一定影响。肠壁细胞排列松散,细胞膜消融,细胞质密度降低,柱状细胞及杯状细胞微绒毛脱落,内质网轻度扩张,细胞质中出现大量空泡。线粒体无明显病变。 通过上述研究,初步推测中肠肠壁细胞可能是鬼臼毒素的一个主要作用靶标,另外中肠蛋白酶也可能是其的作用靶标之一。

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