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松萝属植物形态学和五种松萝种多糖的分离纯化及活性研究

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第一章文献综述

1.1地衣植物

1.1.1地衣概述

1.1.2地衣的形态特征

1.1.3地衣的经济用途

1.1.4地衣的化学成分

1.2松萝属地衣植物

1.2.1松萝简介

1.2.2本实验所用松萝属植物的形态特征

1.2.3松萝的主要化学成分

1.2.4松萝的国内外研究现状

1.3多糖的研究方法与生物活性

1.3.1多糖的研究方法

1.3.2植物多糖的生物活性

1.4论文的目的和意义

第二章松萝的石蜡切片方法改良及形态学研究

2.1材料、仪器与试剂

2.2实验方法

2.2.1固定

2.2.2软化

2.2.3包埋

2.2.4染色

2.3实验结果与分析

2.3.1石蜡切片方法中出现的问题及处理对策

2.3.2桦树松萝的形态学研究

2.4小结与讨论

第三章粗皮松萝多糖提取分离工艺的研究

3.1材料、仪器与试剂

3.2实验方法

3.2.1粗皮松萝多糖的提取工艺流程

3.2.2测定方法

3.2.3粗皮松萝提取工艺的研究

3.2.4粗皮松萝脱蛋白的工艺的研究

3.3结果与分析

3.3.1糖含量测定的标准曲线

3.3.2蛋白质测定的标准曲线

3.3.3粗皮松萝提取工艺单因素优选

3.3.4脱蛋白工艺研究

3.4结论

3.4.1粗皮松萝提取工艺的研究

3.4.2脱蛋白工艺研究

3.5讨论

第四章五种松萝种多糖的分离纯化及活性的初步研究

4.1材料、仪器与试剂

4.2实验方法

4.2.1松萝多糖的提取、分离、纯化工艺流程

4.2.2糖含量测定

4.2.3透析法除离子和小分子杂质

4.2.4多糖的理化性质

4.2.5层析柱的制备及纯化条件

4.2.6多糖相对分子质量及相对分子质量分布的测定

4.2.7松萝多糖清除DPPH自由基的测定

4.3结果与分析

4.3.1各松萝精制多糖的理化性质

4.3.2松萝多糖的纯化

4.3.3松萝多糖的相对分子质量及相对分子质量分布

4.3.4松萝多糖消除自由基的活性测定

4.4结论

4.5 讨论

参考文献

附图

致 谢

作者简介

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摘要

本文以松萝属地衣植物为材料,对松萝属植物的形态的学和松萝多糖的提取分离、纯化、理化性质及抗氧化活性进行了研究。 1.桦树松萝的石蜡切片方法改良及形态学研究以传统石蜡切片方法为基础,在固定、软化、包埋、染色等具体方法上进行了适合松萝属植物特点的改良。结果表明:采用改良制片方法获得了染色清晰、组织完整的切片。桦树松萝地衣体横切面结构从外到内依次划分为皮层、藻层、髓层和中轴。皮层是由横向分裂的菌丝交织成类似于高等植物的假厚壁组织,藻层由大量共生藻的藻细胞和菌丝所组成;髓层由疏松的菌丝体组成;中轴由致密的菌丝体组成。 2.粗皮松萝多糖提取分离工艺的研究采用单因素及正交试验对多糖提取工艺进行了优化,确定提取的工艺条件:浸提温度80℃,料液比1:30,浸提时间2h,浸提次数2次。采用Sevag法和10%三氯乙酸法除粗皮松萝多糖提取物中蛋白类成分,通过比较两种方法的蛋白质清除率、多糖损失率,发现Sevag法同10%三氯乙酸法除蛋白率相当,但Sevag法多糖的损失率要低很多,因此确定采用Sevag法。在确定采用Sevag法除蛋白后,对sevag法除粗皮松萝粗多糖中的蛋白类成分进行了研究,其应用条件是:样品溶液与Sevag试剂(氯仿:正丁醇=4:1v/v)体积比为3:1,振摇30min,次数为2次。 3.五种松萝种多糖的提取分离、纯化、理化性质、分子量测定以西藏长松萝、东北长松萝、东北环裂松萝、新疆亚花松萝、秦岭粗皮松萝五种药用地衣为材料,提取分离、纯化多糖、并对其理化性质、分子量等方面进行了研究。结果为:(1)提取率比较结果为:秦岭粗皮松萝>新疆亚花松萝>东北环裂松萝>东北长松萝>西藏长松萝;(2)采用DEAE-52纤维素柱和Sephadex G—100凝胶柱分别对五种松萝精制多糖纯化,结果为:五种松萝多糖五种松萝多糖各得到三种组分;(3)各松萝多糖组分的数均分子量(Mn)大多在2.0×10<'6>~3.0×10<'6>之间分布,重均分子量大多在3.0×10<'6>~4.0×10<'6>之间有分布,新疆亚花松萝多糖组分的分子量最高,Mw/Mn分布系数大多在1~2之间。 4.五种松萝种多糖及各组分清除DPPH自由基的活性研究五种松萝种精制多糖对DPPH自由基有一定的清除作用,在一定范围内随着浓度的升高,其抑制率逐渐增大,但与维生素C相比较弱。其活性大小顺序为:秦岭粗皮松萝多糖USM>东北长松萝多糖USLD>新疆亚花松萝多糖USS>东北环裂松萝多糖USD>西藏长松萝多糖USLX。各松萝纯化组分对DPPH自由基清除作用与其精制多糖的清除自由基的能力显著增强,与维生素C的活性相当。

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