Wnt信号通路在肝星状细胞活化中的作用观察

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

背景/目的：各种病因所引起的慢性肝病绝大多数都有肝纤维化(hepati.fibrosis，HF)，其中25％～40％最终发展为肝硬化甚至肝癌，是一类世界性的严重危害人们健康的主要疾病。目前的研究证实，肝星状细胞(hepati.stellat.cells，HSC)的激活是肝纤维化发生的中心环节。各种因素通过不同方式和途径作用于肝脏中的HSC，导致其生物学及功能变化，引起肝纤维化。研究这群细胞复杂的病理生理机制将是抗纤维化治疗发展的关键。
　　 Wnt信号通路是近年来在分子生物学、细胞生物学和肿瘤研究中的一大热点，参与调控细胞的分化、癌变、凋亡及机体免疫、应激等生理病理过程。最近有研究表明Wnt信号通路与HSC的活化及肝纤维化的发生相关，但有关Wnt信号通路相关分子在HSC活化中的作用尚无全面深入的研究。
　　本课题首先利用基因芯片技术观察Wnt信号通路相关分子在HSC活化前后表达水平的变化，并用实时聚合酶反应(rea.tim.PCR.RT-PCR)验证部分表达变化基因；进而观察外源性小鼠Wnt5a(recombinan.Mous.Wnt5a，rmWnt5a)蛋白对HSC-T6增殖及I型胶原合成的影响；以期探讨Wnt信号通路在肝纤维化发生中的作用，进一步揭示肝纤维化的发生机制，为肝纤维化的防治提供新的可能途径及干预靶点。
　　方法：(1).利用胶原酶/链蛋白酶灌注Nycodenz梯密度离心分离大鼠HSC，于体外培养。(2).利用Affymetrix基因芯片观察在HSC活化前后基因谱表达水平的变化，结果中筛选出Wnt信号通路相关分子，以RT-PCR验证部分表达变化的基因。(3).体外培养HSC-T6细胞，加入rmWnt5a蛋白，用CCK-8法检测其对HSC-T6的影响。(4).用ELISA法观察rmWnt5a蛋白对HSC-T6合成I型胶原的影响。
　　结果：(1).基因芯片结果显示，活化的HSC与新鲜分离的静止的HSC比较，表达上调的Wnt信号通路相关基因共13条(Wisp2、Wnt4、Fzd2、PLC、PKC、TGF-β1、Wisp1、TLE3、Ccnd2、Ccnd1、DKK3、Wifl、RhoA)。经RT-PCR验证了其中2条(Wnt4、Fzd2)，结果与芯片检测结果一致。(2).CCK-8实验结果显示，浓度在0.2μg/mL～0.8μg/mL之间的rmWnt5a具有促HSC-T6增殖作用。当rmWnt5a浓度在0.2μg/mL～0.4μg/mL时，随着其浓度增长，对HSC-T6具有显著的浓度依赖性促细胞增殖作用(p<0.05)。当rmWnt5a浓度在0.4μg/mL-0.8μg/mL时，仅有轻度浓度依赖性促细胞增殖作用的趋势，无统计学上的差异(p>0.05)。(3).ELISA实验结果显示，HSC-T6培养细胞上清液中I型胶原含量随着rmWnt5a浓度增加而逐渐增加。rmWnt5.0.2μg/ml组，0.4μg/ml组、0.8μg/ml组与对照组相比，I型胶原含量均有显著性差异(p<0.05)。
　　结论：(1).Wnt信号通路参与了HSC的活化，其中可能以非经典通路途径为主；(2).外源性Wnt5a蛋白对HSC的增殖有促进作用；(3).外源性Wnt5a蛋白可增加HS.I型胶原的表达。

著录项

作者
江鸣;
展开▼
作者单位

同济大学;

同济大学医学院;

展开▼
授予单位同济大学;同济大学医学院;
学科内科学
授予学位硕士
导师姓名熊伍军;
年度 2009
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类肝硬变;
关键词
肝纤维化; 肝星状细胞; 基因芯片; Wnt信号通路; 细胞增殖; I型胶原;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. Wnt信号通路对酒精性肝纤维化中肝星状细胞活化的影响以及整合素连接激酶的调节作用 [J] . 苏金玲 ,姜希娟 ,郭茂娟 . 实用医学杂志 . 2013,第005期
2. Wnt信号通路调控肝星状细胞活化及增殖在肝纤维化治疗中的研究进展 [J] . 马志刚 ,陈兰 ,詹灵凌 . 世界华人消化杂志 . 2014,第21期
3. Wnt信号通路在肝星状细胞激活中作用的研究进展 [J] . . 山东医药 . 2019,第019期
4. 瘦素对肝星状细胞活化的调控及其在肝纤维化进展中的作用 [J] . 王琼 ,詹江华 . 天津医药 . 2022,第1期
5. R-Spondin2、 Syndecan-1在小鼠肝星状细胞活化中的作用研究 [J] . 殷新光 ,徐龙生 ,吴一鸣 . 浙江医学 . 2019,第010期
6. 大麻素受体在肝星状细胞活化中的作用及姜黄素干预效应 [C] . 张自力 ,张涉 . 第六届全国大学生创新创业年会 . 2013
7. 细胞连接蛋白在肝星状细胞活化中的作用 [A] . 刘爽 . 2018

Wnt信号通路在肝星状细胞活化中的作用观察

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅