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声明
第一章逆转录病毒介导的RNA干扰技术的建立
1引言
2材料与方法
2.1实验材料
2.2实验方法
3结果
3.1逆转录病毒介导的靶向P53基因的RNA干扰实验流程
3.2融合逆转录病毒载体的构建
3.3单克隆抗性细胞库的建立
3.4单克隆抗性细胞中P53基因表达的Western印迹分析
3.5二次转染细胞中P53基因表达的Western印迹分析
3.6二次转染细胞中多腺苷酸合成酶1(OAS1)基因的表达
4讨论
4.1逆转录病毒介导体系易于导入细胞和筛选稳定克隆
4.2逆转录病毒载体介导的RNA干扰体系具有特异性、高效性和稳定性
4.3逆转录病毒介导的RNA干扰不会引起抗病毒防御机制
4.4逆转录病毒介导的RNA干扰技术应用前景广阔
参考文献
第二章逆转录病毒介导的RNA干扰对HepG2细胞中HBV基因表达的抑制作用
1引言
2材料与方法
2.1实验材料
2.2实验方法
3 结果
3.1逆转录病毒介导的靶向HBV基因的RNA干扰实验流程
3.2 SIRNA的设计
3.3融合逆转录病毒载体的构建
3.4抗性细胞库的建立及U6-siRNA表达盒的整合
3.5 HepG2细胞中HBsAg和HBeAg蛋白质量分析
3.6 HepG2细胞中HBV mRNA含量的分析
4讨论
参考文献
第三章逆转录病毒介导的RNA干扰对HepG2.2.15细胞中HBV基因表达和复制的抑制
1引言
2材料与方法
2.1实验材料
2.2实验方法
3结果
3.1融合逆转录病毒载体的构建
3.2抗性细胞库的建立及鉴定
3.3 HepG2.2.15细胞中HBsAg、HBeAg的表达水平分析
3.4 HepG2.2.15细胞中HBV mRNA水平分析
3.5 HepG2.2.15细胞中HBV DNA水平分析
4讨论
参考文献
第四章修饰性RNA寡核苷酸毒性分析
1引言
2材料与方法
2.1实验材料
2.2实验方法
3结果
3.1小分子RNA的安全性检测实验流程
3.2细胞毒性分析
3.3动物毒性分析
3.4组织病理学分析
3.5荧光标记的cm-RNA oligos在动物不同组织器官中的分布
4讨论
参考文献
文献综述:RNA干扰技术及其应用
致谢
在读期间发表的论文