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木荷植物提取物杀福寿螺效果及活性物质研究

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摘要

第一章 文献综述

1.福寿螺的发生与危害

2.福寿螺的防治现状

3.植物源灭螺剂研究近展

3.1 植物源灭螺剂灭螺活性研究进展

3.2 植物源灭螺剂的有效成分研究进展

4.木荷研究概况

5.本实验研究意义与内容

6.技术路线

第二章 木荷对福寿螺的毒杀效果研究

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.2 试验方法

2 结果与分析

2.1 木荷3种溶剂粗提取物的提取效果

2.2 木荷不同溶剂提取物对福寿螺的毒杀活性

2.3 木荷茎皮甲醇提取物杀福寿螺的毒力测定

3 讨论

第三章 木荷茎皮甲醇提取物杀螺活性物质研究

1.材料与方法

1.1 供试材料

1.2 方法

2 结果与分析

2.1 木荷茎皮乙醇粗提取物的粗分离

2.2 C18柱层析对木荷茎皮乙醇提取物活性物质的分离

2.3 活性流份高效液相色谱制备及化合物结构鉴定

2.4 化合物生物活性测定

3.讨论

第四章 结论

参考文献

致谢

附图

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摘要

植物灭螺剂是创制新型灭螺药物的重要途径。本文以山茶科(Theaceae)植物木荷(Schima superba)为研究对象,系统研究了木荷(Schima superba)对福寿螺的毒杀活性,并进一步研究了木荷植物的灭螺活性物质。主要研究结果如下:
  1.分别测定了甲醇、乙酸乙酯、石油醚3种溶剂对木荷茎皮和叶提取物的灭螺活性的影响。结果表明,木荷茎皮甲醇提取物、乙酸乙酯提取物、叶乙酸乙酯提取物对福寿螺均表现出明显的灭螺活性。其中,木荷茎皮甲醇提取物对福寿螺毒杀活性最明显,在20.00μg/mL浓度下,48h校正死亡率为95.00%。
  2.进一步测定了木荷茎皮甲醇提取物在不同水温和不同大小螺体下对福寿螺的生物活性。不同水温灭螺结果表明,在15℃C、20℃、25℃温度条件下,木荷茎皮提取物对外壳直径为25±2mm的福寿螺24h的致死中浓(LC50)值分别为31.45μg/mL、19.07μg/mL、18.79μg/mL;48h的LC50值分别为14.70μg/mL、14.37μg/mL、8.83μg/mL;72h的LC50值为12.25μg/mL、11.31μg/mL、8.33μg/mL。说明在一定温度范围内,随着水温的上升,药剂对福寿螺的毒杀效果越明显。不同大小螺体灭螺结果表明,在25℃水温条件下,以外壳直径为15±2mm、25±2mm、35±2mm的福寿螺作为生测对象,其24h的LC50值分别为16.60μg/ml、18.56μg/ml、19.41μg/ml;48h的LC50值分别为9.57μg/mL、9.90μg/mL、11.18μg/mL;72h的LC50值为9.43μg/mL、9.48μg/mL、10.06μg/mL。说明螺体大小对木荷毒杀福寿螺效果无明显的影响。
  3.采用滩涂和模拟田间浸杀试验,研究了10%木荷茎皮提取物微乳剂对福寿螺的毒杀效果。滩涂试验结果表明,10%木荷茎皮提取物微乳剂在200μg/ml浓度下,其1d、3d、5d和7d防治效果分别为23.33%、31.67%、33.33%和41.67%,与2μg/ml氯硝柳胺防治效果相比,均差异显著。浸杀试验结果表明,10%木荷茎皮提取物微乳剂在8μg/mL浓度下,其1d、3d、5d和7d防治效果分别为61.11%、86.67%、92.22%和93.33%,与2μg/mLl氯硝柳胺相比,差异均不显著。说明以10%木荷茎皮提取物微乳剂防治福寿螺,采用浸杀方式的防治效果要显著好于滩涂效果。
  4.采用大孔树脂、C18柱层析以及高效液相色谱等手段,结合活性追踪,对木荷茎皮甲醇提取物进行了活性成分分离、纯化及结构鉴定。最终获得了4个化合物,分别为油茶皂苷Ⅲ、Maetenoside B、原花青素B2、(-)-表儿茶素。其中,油茶皂苷Ⅲ、Maetenoside B两化合物对福寿螺表现出明显的毒杀活性。

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