多功能纳米磁性粒子的合成及其在细胞富集和质粒DNA纯化中的应用研究

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符号说明

第一章 文献综述

1.1 引言

1.1.1 磁性纳米粒子

1.1.2 对生物相容性磁性纳米粒子的一般要求

1.2 磁性纳米粒子的制备方法

1.2.1 化学共沉法

1.2.2 高温分解法

1.2.3 微乳液法

1.2.4 水热合成法

1.2.5 溶胶-凝胶法

1.2.6 其它方法

1.3 超声化学

1.3.1 超声化学原理

1.3.2 超声波在聚合物合成方面的应用

1.3.3 超声波在纳米材料合成及改性方面的应用

1.4 磁性纳米粒子在生物学中的应用

1.4.1 靶向药物

1.4.2 磁热疗

1.4.3 磁共振成像

1.4.4 固定化

1.4.5 分析检测

1.4.6 分离纯化

1.5 质粒DNA提取技术研究现状

1.5.1 菌体裂解

1.5.2 质粒DNA纯化

1.6 本研究的目的和内容

1.6.1 研究目的意义

1.6.2 研究内容

第二章 羧基功能化磁性纳米粒子(CMNPs)的超声辅助合成研究

2.1 引言

2.2 材料与方法

2.2.1 实验材料及仪器设备

2.2.2 铁氧体磁性纳米粒子的制备

2.2.3 CMNPs的超声辅助合成

2.2.4 表征方法

2.3 结果与分析

2.3.1 CMNPs的表观鉴定

2.3.2 透射电镜分析

2.3.3 磁性能分析

2.3.4 红外光谱分析

2.3.5 热重-微分热重分析

2.3.6 X射线衍射分析

2.3.7 动态光散射分析

2.4 本章小结

第三章 羧基磁性纳米粒子富集大肠杆菌研究

3.1 引言

3.2 材料与方法

3.2.1 试剂与仪器

3.2.2 重要试剂配置方法

3.2.3 菌种活化

3.2.4 细菌增殖

3.2.5 辅助CMNPs捕获大肠杆菌的试剂筛选

3.2.6 酸辅助CMNPs捕获菌体条件优化

3.2.7 钙盐辅助CMNPs捕获菌体条件优化

3.2.8 金属盐辅助CMNPs捕获菌体提取质粒DNA的可行性分析

3.3 结果与讨论

3.3.1 大肠杆菌捕获试剂筛选

3.3.2 pH对CMNPs捕获大肠杆菌的影响

3.3.3 pH对未包覆磁性纳米粒子捕获菌体的影响

3.3.4 钙盐对CMNPs捕获菌体的影响

3.3.5 金属盐辅助CMNPs捕获菌体提取质粒DNA的可行性分析

3.4 本章小结

第四章 羧基磁性纳米粒子在SPRI法纯化质粒DNA中的应用研究

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.2.1 试剂与仪器

4.2.2 重要试剂配置方法

4.2.3 细菌增殖

4.2.4 菌体粗提液大量制备

4.2.5 CMNPs辅助法小量制备菌体粗提液

4.2.6 结合液(PEG8000/NaCl)浓度对质粒DNA纯化的影响

4.2.7 CMNPs用量对质粒DNA纯化的影响

4.2.8 质粒DNA吸附/解吸附动力学研究

4.2.9 温度对质粒DNA吸附的影响

4.2.10 温度对质粒DNA和RNA降解的影响

4.2.11 SPRI法与其它提取法比较

4.2.12 蛋白质含量测定

4.2.13 质粒DNA酶切鉴定

4.2.14 电泳图谱的定量分析方法

4.3 结果与讨论

4.3.1 结合液浓度对质粒DNA纯化的影响

4.3.2 CMNPs用量对质粒DNA纯化的影响

4.3.3 吸附时间的影响

4.3.4 解吸附时间影响

4.3.5 温度对质粒DNA吸附的影响

4.3.6 温度对DNA和RNA差示吸附的影响

4.3.7 温度对DNA和RNA降解的影响

4.3.8 SPRI法与其它提取法比较

4.3.9 蛋白质含量检测

4.3.10 质粒DNA酶切鉴定

4.3.11 基于CMNPs快速小量质粒DNA提取

4.4 本章小结

第五章 凝聚试剂介导的羧基磁性纳米粒子富集核酸研究

5.1 引言

5.2 材料与方法

5.2.1 试剂与仪器

5.2.2 重要试剂配置方法

5.2.3 大肠杆菌增殖

5.2.4 脱盐菌体粗提液大量制备

5.2.5 凝聚试剂浓度对核酸沉淀的影响

5.2.6 凝聚试剂对CMNPs吸附核酸的影响

5.2.7 质粒DNA酶切鉴定

5.2.8 蛋白质含量测定

5.2.9 电泳图谱的定量分析方法

5.3 结果与讨论

5.3.1 亚精胺对CMNPs富集核酸的影响

5.3.2 精胺对CMNPs富集核酸的影响

5.3.3 蛋白质含量检测

5.3.4 质粒DNA酶切鉴定

5.4 本章小结

创新点

参考文献

致谢

攻读博士学位期间发表的论文