论文说明：缩略词表
声明
前 言
一、附睾的结构和功能
二、精子在附睾中发生的变化
三、附睾中基因和蛋白质的表达特点
四、核糖核酸酶RNases的分类和分布
五、RNases的特征
六、RNases的功能
第一章 大鼠附睾特异性基因Rnase9的克隆及性质研究
材料和方法
实验动物
大鼠RNASE9的DNA和蛋白质序列获得
组织总RNA的制备
RT-PCR及测序
大鼠阉割实验和雄激素补充实验
输精管接扎实验
Northern Blot分析
大鼠RNASE9的重组表达和抗血清的制备
ELISA
Western免疫印迹分析
PNGase-F糖苷酶消化
免疫组化分析
间接免疫荧光
精子结合
大鼠RNASE9的可溶性重组表达
重组大鼠RNASE9的稀释复性
核糖核酸酶裂解活性分析
结 果
大鼠Rnase9 cDNA的获得和分析
大鼠Rnase9 mRNA在附睾特异性表达并且受雄激素的调控
大鼠Rnase9与猴子RNASE9的同源性分析
大鼠附睾RNASE9成熟肽表达及抗体制备
大鼠附睾RNASE9重组蛋白极易聚合且体内存在着翻译后修饰
大鼠RNASE9在附睾组织不同部位和不同细胞的表达
大鼠Rnase9 mRNA在整个生育期都有表达
附睾中RNASE9与精子的结合
两种抗体的比较
大鼠附睾Rnase9在附睾炎模型中的表达变化
大鼠附睾RNASE9重组蛋白的原核表达复性和活性分析
讨论
第二章 小鼠附睾Rnase9的克隆和分析
材料和方法
小鼠附睾Rnase9 cDNA的克隆及分析
小鼠附睾组织RNA抽提和RT-PCR及测序分析
小鼠附睾RNASE9的重组表达和纯化
抗血清的制备
抗血清的纯化
小鼠的阉割和雄激素补充实验
重组表达的小鼠附睾RNASE9的复性
核糖核酸酶活性分析
抗菌活性分析
对精子运动的影响
结 果
小鼠附睾Rnase9 cDNA的克隆
小鼠Rnase9 mRNA的组织分布和调节
小鼠Rnase9 mRNA在发育过程中的表达
重组小鼠RNASE9的表达和抗体制备
小鼠RNASE9在组织中的定位
精子结合
重组的小鼠RNASE9的表达及复性
核糖核酸酶活性分析
抗菌活性
对精子运动的影响
讨 论
参考文献
在学期间发表的文章
致 谢
