基于二维凝胶电泳与质谱联用的枯草芽孢杆菌蛋白质组分析

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第一章 文献综述

1.1蛋白质组学简介

1.1.1蛋白质组学研究背景

1.1.2蛋白质组学研究的策略和范围

1.2蛋白质组学研究的主要技术

1.2.1蛋白质提取和样品制备技术

1.2.2二维凝胶电泳技术

1.2.3凝胶染色技术

1.2.4图像分析技术

1.2.5色谱技术

1.2.6稳定同位素标记技术

1.2.7质谱技术

1.2.8生物信息学

1.3蛋白质组学的应用

1.3.1蛋白质组学在基础生物学、药物开发和临床医学中的应用

1.3.2蛋白质组学在微生物代谢工程方面的应用

1.4蛋白质组学面临的挑战和机遇

1.5本文主要研究内容和技术路线

第二章 实验材料与方法

2.1实验材料

2.1.1菌种

2.1.2培养基

2.1.3实验药品与试剂

2.1.4仪器与设备

2.1.5主要溶液

2.2实验方法

2.2.1菌体培养与收集

2.2.2蛋白质样品的制备

2.2.3二维电泳之等电聚焦

2.2.4二维电泳之SDS-PAGE

2.2.5考马斯亮蓝胶体染色

2.2.6图像扫描

2.2.7图像分析

2.2.8蛋白质胶内酶解与质谱前预处理

2.2.9质谱鉴定

第三章 实验结果与讨论

3.1实验操作方法改进

3.1.1细胞超声破碎条件改进

3.1.2质谱基质配比改进

3.2生长曲线对比

3.3 Bacillus subtilis 168和Bacillus subtilis RH44蛋白表达图谱

3.4 Bacillus subtilis 168和Bacillus subtilis RH44差异蛋白质分析

3.4.1糖酵解途径

3.4.2三羧酸循环

3.4.3戊糖磷酸途径

3.4.4嘌呤代谢

3.4.5嘧啶代谢

3.4.6核黄素代谢

3.4.7氨酰-tRNA合成

3.4.8其余相关代谢途径蛋白质表达差异

3.4.9其余非代谢途径蛋白质表达差异

第四章 结论与展望

4.1结论

4.2展望

参考文献

致谢