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马链球菌马亚种新疆分离株菌体蛋白的粗提取及免疫效果初步评估

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论文说明

摘要

英文缩略表

第1章 马腺疫概述

1.1 临床症状

1.3 病原

1.4 马腺疫流行病学

1.4.1 流行特点

1.4.2 流行情况

1.5 致病机理

1.6 致病因子

1.7 马腺疫诊治与预防

1.7.1 马腺疫诊断

1.7.2 马腺疫防治

1.7.3 马腺疫预防与控制

第2章 马链球菌马亚种菌体蛋白与疫苗研究进展

2.1 马链球菌马亚种的菌体蛋白

2.1.1 类M蛋白

2.1.2 其它菌体蛋白成分

2.2 国内外疫苗研究现状

2.2.1 全菌灭活苗与弱毒苗

2.2.2 提取物疫苗

2.2.3 基因工程亚单位疫苗

2.3 研究目的和意义

第3章 马链球菌马亚种XZ1株菌体蛋白的粗提取

3.1 材料与方法

3.1.1 材料

3.1.2 实验方法

3.2 实验结果

3.2.1 提取菌体蛋白的SDS-PAGE电泳

3.3 讨论

第4章 马链球菌马亚种XZ1株菌体蛋白的反应原性分析

4.1 材料与方法

4.1.1 材料

4.1.2 实验方法

4.2 实验结果

4.2.1 Western-blot分析提取的菌体蛋白对兔抗全菌血清的识别

4.2.2 Western-blot分析提取的菌体蛋白对康复马血清的识别

4.2.3 马链球菌马亚种菌体蛋白及全菌抗原ELISA检测对马血清中抗体的识别

4.3 讨论

第5章 马链球菌马亚种XZ1菌体蛋白小鼠免疫效果

5.1 材料与方法

5.1.1 菌种

5.1.2 主要仪器

5.1.3 主要试剂

5.1.4 菌体蛋白的提取及免疫原的制备

5.1.5 小鼠免疫方法及分组

5.1.6 免疫后抗体检测

5.1.7 小鼠攻毒试验

5.2 实验结果

5.2.1 免疫后的小鼠抗体对提取的菌体蛋白Western-blot检测

5.2.2 提取的菌体蛋白免疫后的抗体水平比较

5.2.3 免疫保护力实验

5.3 讨论

第6章 马链球菌马亚种XZ1株菌体蛋白马免疫实验

6.1 材料与方法

6.1.1 菌种

6.1.2 主要仪器

6.1.3 培养基及试剂

6.1.4 马免疫方法及分组

6.1.5 免疫后抗体检测

6.1.6 MTT实验

6.2 实验结果

6.2.1 免疫后的抗体检测

6.2.2 MTT实验结杲

6.3 讨论

第7章 全文总结

参考文献

附录

致谢

个人简历

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摘要

马腺疫是由马链球菌马亚种引起的严重危害马属动物传染病之一,该病给马养殖业造成严重经济损失。可引起马高烧,下颌淋巴结肿大等症状。马链球菌马亚种属于Lancefield C型链球菌,该菌具有多种菌体蛋白,成为其重要的毒力因子和保护性抗原。本研究主要对马链球菌马亚种新疆分离株XZ1菌体蛋白的免疫原性与免疫保护力进行分析。
  本研究提取了马链球菌马亚种新疆分离株XZ1的菌体蛋白,利用SDS-PAGE方法检测提取的菌体蛋白,分别将提取的菌体蛋白与兔抗全菌的抗体及康复马血清反应,利用Western-blot和ELISA试验分析其免疫原性,二者的实验结果均表明提取的菌体蛋白具有良好的抗体识别能力且能够与康复马抗体反应的能力。
  为探索马链球菌马亚种新疆分离株提取的菌体蛋白免疫效果,本研究利用提取马链球菌马亚种菌体蛋白免疫小鼠并检测免疫后的抗体水平及免疫保护力。结果表明,提取的菌体蛋白免疫小鼠后,可诱导小鼠产生特异性抗体,免疫后的抗体效价高于灭活的全菌,对小鼠的免疫保护率可达到67%;表明该菌体蛋白具有良好的免疫保护效果。
  为进一步检测菌体蛋白对马的免疫效果,我们将提取马链球菌马亚种新疆分离株的菌体蛋白免疫马并检测免疫后抗体水平和细胞免疫水平。结果表明,该菌体蛋白能够诱导马产生特异性抗体并可诱导机体的细胞免疫应答,二免后抗体水平及细胞免疫水平同对照组相比差异显著(P<0.01),该结果为进一步开发有效的马腺疫的防控方法提供了理论和实践基础。

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