农杆菌介导法转hpalxoo基因棉花再生植株建立及转hpalxoo基因棉细胞组织抗病表型鉴定

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第一章文献综述

1.1植物基因工程研究进展及应用

1.2棉花转基因研究进展

1.2.1棉花概述

1.2.2棉花转基因研究概况

1.3遗传转化方法

1.3.1农杆菌介导法

1.3.2花粉管通道法

1.3.3基因枪转化法

1.4棉花组织培养

1.5农杆菌介导棉花基因转化的影响因素

1.5.1植物基因型

1.5.2外植体来源

1.5.3生理状态

1.5.4外植体预培养与共培养

1.5.5药物选择及药物筛选压力的选择

1.6棉花黄、枯萎病病原菌的分类、传播途径、致病机制

1.6.1黄萎病

1.6.2枯萎病

1.6.3棉花黄萎病、枯萎病的危害

1.6.4黄萎病、枯萎病的传播途径

1.6.5黄萎病、枯萎病的致病机理

1.7 Harpin蛋白研究及其应用

1.7.1编码harpin蛋白的hrp基因

1.7.2 Harpins诱导的抗病反应

1.7.3 Harpin蛋白在植物抗病信号传导研究中的作用

1.7.4编码harpin蛋白的hrp基因在分子育种中的作用

1.8植物细胞培养

1.9本研究的目的和意义

第二章棉花离体茎尖外植体的转基因植株再生体系建立的研究

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果与分析

2.2.1激素对棉花茎尖分化的影响

2.2.2农杆菌感染浓度对遗传转化的影响

2.2.3共培养时间和方式对再生频率的影响

2.2.4 Km筛选浓度的确定

2.2.5两种农杆菌菌株的比较

2.2.6卡那霉素抗性植株的PCR检测

2.3讨论

2.3.1受体材料的选择

2.3.2植物激素浓度对棉花茎尖分化的影响

2.2.3 Km筛选浓度的确定对棉花茎尖分化的影响

2.3.4外植体的褐变

2.3.5抑菌剂对外植体的影响

第三章棉花离体下胚轴为外植体的转基因植株再生体系建立的研究

3.1材料和方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果与分析

3.2.1激素对棉花下胚轴愈伤组织分化的影响

3.2.2不同碳源对棉花下胚轴愈伤组织形成的影响

3.2.3愈伤组织的不同状态与体胚细胞的分化

3.2.4农杆菌感染浓度对遗传转化的影响

3.3讨论

3.3.1转化棉花胚性愈伤可以有效缩短转基因周期

3.3.2基因型与再生成苗的关系

3.3.3植物激素2，4-D与胚性愈伤组织形成的关系

3.3.4氮素与胚性愈伤组织形成的关系

3.3.5卡那霉素对下胚轴愈伤组织诱导及生长的影响

第四章转hpalxoo基因棉悬浮细胞抗病性鉴定

4.1材料与方法

4.1.1材料

4.1.2方法

4.2结果与分析

4.2.1棉花胚性愈伤悬浮细胞生长过程的细胞学观察

4.2.2棉花悬浮细胞与黄、枯萎菌共培养的观察及棉花悬浮细胞死亡率的统计

4.3讨论

4.3.1棉花愈伤组织悬浮培养的细胞多态性与抗黄、枯萎病的关系

4.3.2不同激素及浓度配比对棉花胚性愈伤悬浮细胞生长的影响

第五章棉花黄萎病诱导了转hpalxoo基因棉花产生微过敏防御反应

5.1材料与方法

5.1.1材料

5.1.2试验方法

5.2结果与分析

5.2.1接菌后不同时段转基因棉花与非转基因棉花的显微观察

5.2.2接菌20d后转基因棉花与非转基因棉花的形态学观察

5.3讨论

5.3.1过敏性反应与植物抗病性的关系

5.3.2酚类物质与植物抗性的关系

第六章结论

6.1建立了以棉花茎尖为受体的农杆菌介导转hpalxoo基因棉花再生体系

6.2转化棉花胚性愈伤可以有效缩短转基因周期

6.3转hpalxoo基因棉悬浮细胞抗病性与出发品种抗病性比较

6.4棉花黄萎病菌诱导了转hpalxoo基因棉花产生微过敏防御反应

参考文献:

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