肿瘤细胞化疗后Tc-DTPA-DG摄取研究及肺癌Calu-3细胞核摄取Tc-DTPA-DG研究

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目的： ①探讨99mTc标记二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖(99mTc-diethylenetriamine pentaacetic acid-deoxyglucose，99mTc-DTPA-DG)在恶性肿瘤化疗早期疗效监测中的应用价值。 ②探讨99mTc-DTPA-DG是否进入肿瘤细胞核，从而降低肿瘤诊断的假阳性率，进一步验证其用于肿瘤显像的潜在可行性。方法： ①将体外培养的肺癌细胞A549(腺癌)、乳腺癌细胞MCF-7和结肠癌细胞HT-29加入24孔培养板中，各分为加入化疗药物的化疗组和加入生理盐水的阴性对照组，所选化疗药物分别为顺铂(5、10μ/ml)、紫杉醇(7、14、28μ/ml)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-Fu，35、70μ/ml)。化疗药作用6h后，倒置显微镜下观察各化疗组和对照组细胞形态变化及有无凋亡小体产生，消化收集细胞，并行磷脂结合蛋白V(Annexin V，AV)/碘化丙啶(propidium iodide，PI)双标记染色，采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。化疗药作用4h后，各化疗组和对照组细胞分别加入37Maq/L的99mTc-DTPA-DG各0.1ml/孔，继续培养2h，消化收集细胞，用γ测量仪检测99mTc-DTPA-DG摄取率。 ②将体外培养的肺癌细胞Calu-3(腺癌)分为5组：a．99mTc-DTPA-DG组，b．18F-FDG组，c．99mTc-DTPA组，d．99mTcO4组，e．生理盐水组。每种药物各设3个浓度，即每孔加入其中一种放射性药物5、10或20μCi/0.1ml，对照组加入同等量生理盐水，每组各设5个复孔。加入各种药物及生理盐水反应2h，消化收集细胞，用γ测量仪检测各组细胞放射性计数后，采用渗透溶胀法分离细胞核，检测细胞核的放射性计数，分离的细胞核涂片行苏木素伊红(hemaoxyline eosin，HE)染色后镜检。结果： ①肺癌细胞A549、乳腺癌细胞MCF-7及结肠癌细胞HT-29分别经顺铂、紫杉醇及5-Fu作用6h后，倒置显微镜下观察均可见细胞出现明显的凋亡形态改变，并可见凋亡小体形成。流式细胞仪检测也均出现凋亡峰及较高的细胞凋亡率。三种肿瘤细胞各化疗组的凋亡率和对照组相比均明显增加，差异均有统计学意义(P<0.05)，且随着化疗药物浓度升高，细胞凋亡率逐渐增加。γ测量仪检测显示三种肿瘤细胞化疗组99mTc-DTPA-DG摄取率均明显低于对照组(P<0.05)，且随着化疗药物浓度升高，99mTc-DTPA-DG摄取率逐渐降低。 ②肺癌细胞Calu-3分离胞核涂片行HE染色后镜检见细胞核被苏木素染成蓝紫色，胞浆被伊红染成粉红色，后者数量少，计数结果显示细胞核计数占细胞总计数的比例达95％。γ测量仪检测显示肺癌细胞Calu-3对99mTc-DTPA-DG和18F-FDG各放射性活度组的摄取均明显高于99mTc-DTPA、99mTcO4-及生理盐水组，差异有统计学意义(P<0.05)，且肺癌细胞对18F-FDG的摄取明显高于对99mTc-DTPA-DG的摄取。99mTc-DTPA-DG组显示随其放射性活度增加，肺癌细胞对其摄取比率渐降低。18F-FDG组显示随其放射性活度增加，肺癌细胞对其摄取比率先升高后降低。肿瘤细胞对99mTc-DTPA和99mTcO4-的摄取与生理盐水组相比差异无统计学意义(P>0.05)。细胞核计数结果显示，99mTc-DTPA-DG组进入细胞核比率明显高于18F-FDG组(P<0.05)。结论： ①可以通过肿瘤细胞对99mTc-DTPA-DG摄取率变化来反应化疗效果，99mTc-DTPA-DG摄取减少，反映化疗效果好，反之则表示化疗效果差，故99mTc-DTPA-DG是一种可望用于肿瘤化疗效果早期评估的显像剂。 ②99mTc-DTPA-DG可以进入肿瘤细胞核，故在区分炎症与肿瘤方面有价值，可以降低肿瘤诊断的假阳性率，是一种潜在的可用于肿瘤显像的靶向分子显像剂。

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作者
梁杰;
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作者单位

西南医科大学;

泸州医学院;

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授予单位西南医科大学;泸州医学院;
学科影像医学与核医学
授予学位硕士
导师姓名陈跃;
年度 2008
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类放射线、同位素诊断;
关键词
恶性肿瘤; 放射疗法; 疗效监测; 分子显像剂;

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