小菜蛾两种重要内寄生蜂的毒液分子特性研究

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致谢

摘要

前言

第一章 文献综述

1 内寄生蜂毒液的研究进展

2 本研究目的和意义

第二章 基本材料和方法

1 昆虫饲养相关设备

1．1 全自动人工气侯室

1．2 日光蔬菜大棚

1．3 智能人工气候籍

1．4 养虫笼

1．5 养蜂罐

1．6 吸虫管

1．7 养虫盒

2 供试昆虫的人工饲养

2．1 供试蔬菜

2．2 虫源

2．3 寄主昆虫的饲养

2．4 寄生蜂的饲养

3 常用试剂的配制

3．1 感受态细胞的制备

3．2 Luria-Bertani(LB)培养基的制备

3．3 琼脂糖凝胶电泳相关试剂

3．4 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)相关试剂

3．5 酶联免疫吸附试验(ELISA)相关试剂

4 主要实验方法

4．1 Trizol法提取总RNA

4．2 cDNA文库的构建

4．3 琼脂糖凝胶电泳

4．4 DNA凝胶回收

4．5 连接反应

4．6 质粒或连接产物的转化

4．7 表达载体构建

4．2 SDS-PAGE凝胶电泳

第三章 两种寄生蜂毒腺转录组的测序与分析

1 材料与方法

1．1 昆虫的饲养和样品制备

1．2 RNA抽提和测序文库构楚

1．3 Illumina测序结果的分析

1．4 分泌蛋白预测

1．5 预测编码可能毒液蛋白的unigenes

2 结果和分析

2．1 Illumina测序和序列组装

2．2 序列的注释

2．3 基因的COG注释

2．4 GO和KEGG分析

2．5 可能编码毒液蛋白的unigenes预测

2．6 讨论

3 结论

第四章 部分毒液基因的克隆及原核表达

1、颈双缘姬蜂蜂毒类毒液抗原5基因的克隆及原核表达

1．1 材料与方法

1．2 结果与分析

1．3 结论

2 菜蛾盘绒茧蜂蜂毒类毒液过敏原5基因的克隆及原核表达

2．1 材料与方法

2．2 结果与分析

2．3 结论

3 颈双缘姬蜂蜂毒类透明质豉酶基因的克隆和序列分析

3．1 材料与方法

3．2 结果与分析

3．3 结论

4 菜蛾盘绒茧蜂蜂毒类透明质酸酶基因的克隆和序列分析

4．1 材料与方法

4．2 结果与分析

4．3 结论

5 颈双缘姬蜂蜂毒类ADAMTS基因的克隆及屎核表达

5．1 材料与方法

5．2 结果与分析

5．3 结论

6 菜蛾盘绒茧蜂蜂毒类毒液Vn4．6基因的克隆及原核表达

6．1 材料与方法

6．2 结果与分析

6．3 结论

第五章 颈双缘姬蜂毒液的蛋白组分析

1 材料与方法

1．1 毒液样品的制备

1．2 毒液样品的消化

1．3 LC-MS/MS

1．4 数据分析

1．5 GO注释

2 结果与讨论

2．1 质谱Base peak图谱

2．2 蛋白鉴定结果

2．3 蛋白的GO注释

3 结论

第六章 菜蛾盘绒茧蜂毒腺与畸形细胞转录组的比较分析

1 材料和方法

2 结果分析与讨论

2．1 菜蛾盘绒茧蜂毒腺与畸形细胞差异表达基因确定与分析

3 结论

全文小结

主要研究结果

创新之处

不足之处

今后的研究方向

附章 颈双缘姬蜂毒液作用机制的发育生物学基础

参考文献

作者简历