前 言
材料与方法
1.菌株和材料
2.培养基
3.试剂
4.仪器设备
5.几丁质酶/壳聚糖酶产生菌的筛选
5.1富集培养与平板第一次筛选
5.2平板第二次筛选
6.几丁质酶和壳聚糖酶产生菌CJ-5的分类鉴定
6.1形态特征鉴定
6.2生理生化特性鉴定
7.摇瓶中CJ-5产几丁质酶发酵条件的优化
7.1制作乙酰氨基葡萄糖标准曲线和氨基葡萄糖标准曲线
7.2.壳聚糖酶和几丁质酶活力的测定
7.3发酵条件的优化
7.4四因素三水平正交试验
7.5 3L发酵罐中CJ-5发酵产酶的研究
7.6 CJ-5菌产壳聚糖酶发酵条件优化
8.几丁质酶/壳聚糖酶理化性质的初步研究
8.1几丁质酶/壳聚糖酶的硫酸铵沉淀
8.2双缩脲测定粗酶蛋白质含量,折算酶活力
8.3酶反应的最适温度和酶的热稳定性
8.4酶反应的最适pH和酶的酸碱稳定性
8.5几丁质酶、壳聚糖酶分子量确定
9.几丁质酶/壳聚糖酶降解产物和降解机理初探
10.CJ-5发酵液生理活性初探
10.1抑制植物病原真菌生长的活性
10.2促进水稻幼苗生长的活性
结 果
1.几丁质酶产生菌的筛选
1.1富集培养和平板第一次筛选
2.菌种的分类鉴定
3.摇瓶中的发酵条件研究
3.1制作氨基葡萄糖标准曲线与N-乙酰氨基葡萄糖标准曲线
3.2不同温度对菌体生长的影响
3.3不同底物浓度对菌体生长的影响
3.4诱导性与不同碳源对菌株几丁质酶活性的影响
3.5不同氮源对菌株产几丁质酶活性的影响
3.6不同温度对菌株产几丁质酶活性的影响
3.7不同接种量对产几丁质酶活性的影响
3.8发酵培养基初始pH值对菌株产几丁质酶活性的影响
3.9不同底物浓度对产几丁质酶活性的影响
3.10不同装量对产几丁质酶活性的影响
3.11细菌产几丁质酶的正交试验
3.12 3L发酵罐的发酵情况
3.13 CJ-5产壳聚糖酶的正交试验
3.14在最适产酶条件下,CJ-5菌以几丁质和壳聚糖为底物的生长情况及pH变化,还原糖变化和酶活变化
4.几丁质酶和壳聚糖酶理化性质的初步研究
4.1酶蛋白的硫酸铵沉淀
4.2酶蛋白浓度初步分析
4.3几丁质酶和壳聚糖酶的最适反应温度与pH,以及热与pH稳定性的研究
4.4酶的分子量确定
4.5酶产物分析
5.生物活性的初步试验
5.1抑菌实验
5.2水稻幼苗生长试验
讨论
1.几丁质酶产生菌的筛选
2.CJ-5菌种的分类鉴定
3.酶活力测定方法
4.发酵条件的研究
5.酶的盐析沉淀
6.酶分子量的确定
7.酶学性质的研究
8.酶解产物及酶作用机理分析
9.酶生物活性的研究
结束语
参考文献
致 谢