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克百威的ELISA试剂盒研制及多克隆抗体解毒功能研究

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目录

文摘

致谢

主要缩略语

第一章文献综述

1.1农药残留分析现状

1.2农药中毒及治疗现状

第二章抗克百威多克隆抗体的制备

2.1概述

2.2材料与方法

第三章克百威试剂盒研制的初步研究

3.1试剂盒标准曲线的建立

3.2试剂盒的精密度测定

3.3试剂盒的准确度测定

3.4样品前处理

3.5高效液相色谱法

3.6试剂盒保存期测定

第四章抗克百威抗体在克百威中毒解救中的应用研究

4.1抗克百威抗体解毒离体实验

4.2抗克百威抗体解毒离体实验

第五章结果与分析

5.1克百威抗原合成

5.2抗克百威抗体的研制

5.3试剂盒的研制结果

5.4抗克百威抗体在解克百威中毒的初步研究

5.5结论

参考文献

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摘要

该研究以2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃氯甲酸酯为基础合成了克百威的两种半抗原,6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH)和4-[[2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸(BFNB).同时将这两种半抗原与载体蛋白牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成克百威免疫原和包被抗原,并用紫外光谱法测定克百威与载体蛋白结合物结合比.在优化免疫学反应条件后,建立了克百威间接竞争ELISA法和直接竞争ELISA法,检测限分别为0.005mg/L和0.01mg/L,检测线性范围分别为0.005~10mg/L和0.01~10mg/L,并在此基础上研制了两种用于检测水、土壤、蔬菜、中毒样品的酶联免疫试剂盒,其试剂盒的重现性好,批内批间及整体变异系数均低于8.0﹪,试剂盒检测的准确度高,除呕吐物样品外,其余样品的回收率均在89.62﹪以上.同时,根据抗体抗原的特异性结合反应的原理,进一步研究了抗克百威抗体对小鼠克百威中毒后的解毒作用,试验结果表明,抗体可以较好地缓解克百威对乙酰胆碱酯酶抑制作用的症状,使中毒小鼠逐渐恢复正常.

著录项

  • 作者

    杨挺;

  • 作者单位

    浙江大学;

  • 授予单位 浙江大学;
  • 学科 农药学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 朱国念,王强;
  • 年度 2002
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 S481.8;
  • 关键词

    克百威; 人工抗原; ELISA试剂盒; 残留;

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