亲和微滤载体的制备及其在抗hCG抗体分离纯化中的应用

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目前,抗体己被广泛应用于疾病的诊断、治疗以及靶向载体等方面,但是其价格昂贵,造成其昂贵的主要原因之一在于其纯化成本高,虽然目前有许多方法用于纯化抗体,但都存在着诸如分辨率不高、处理量不大或分离介质昂贵等缺陷,因此开发更廉价、更简便的纯化方法十分必要。本课题以抗HCG抗体为模型蛋白,选用廉价的小分子亲和配基(磺胺二甲基嘧啶),并结合膜分离处理量大的优点,进行抗体纯化新方法的研究,研究取得的结果如下:
　　首先,以葡聚糖凝胶微球为载体,磺胺二甲基嘧啶为亲和配基,通过环氧接枝,制备了亲和微滤载体,并对制备条件进行了优化,所制得的载体配基密度为85.5μmol/g(湿),而且重复利用率高,耐酸碱性及机械强度良好;将其应用于亲和微滤分离抗体,最佳吸附pH值为6.0,吸附容量为8.1mg/g(湿),一步分离抗体纯度大于95％,回收率69.8%;将其用于柱层析,虽然在酸性条件下洗脱不如蛋白A柱,但在高盐条件下洗脱效果与蛋白A柱相当,活性保持良好。
　　选用不同的膜基质,通过环氧接枝,制备了磺胺二甲基嘧啶亲和膜,并对制备条件进行了优化,结果表明,醋酸纤维素膜为膜基质的效果较好,最终配基密度为114.6μmol/g,将其应用于抗体分离,最佳吸附为pH6.0,吸附容量为5.7mg/g,一步纯化抗体的纯度大于95%,回收率37.6%。

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作者
朱丽;
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作者单位

浙江工业大学;

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授予单位浙江工业大学;
学科微生物与生化药学
授予学位硕士
导师姓名应国清,梅建凤;
年度 2012
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类有机化合物药物的生产;
关键词
抗hCG抗体; 分离纯化; 亲和微滤载体; 葡聚糖凝胶微球;

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