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论文说明：缩略语
声明
第一章 SHP-2蛋白及SH2结构域的研究进展
前言
SH2结构域的研究进展
1.SH2结构域的结构研究
2.SH2结构域的功能研究
3.含SH2结构域的蛋白与疾病，及疾病治疗和药物开发的新思路
SHP-2蛋白的研究进展
1.SHP-2的结构研究
2.SHP-2的功能研究
第二章 试验方案设计
1 试验目的和意义
2 研究内容
3 试验流程图
第三章 生物信息学分析
1 SHP-2的NSH2基因的同源基因序列和氨基酸序列的比较
2 SHP-2的NSH2氨基酸序列的分析
3 讨论
第四章 NSH2表达载体的设计与构建
1 试剂与材料
1.1 材料
1.2 试剂
1.3 试剂的配制
2 方法
2.1 PCR扩增及酶切
2.2 表达载体的酶切
2.3 连接反应
2.4 E.coli感受态细胞的制备
2.5 连接产物的转化
2.6 重组pCEX-2T-NSH2质粒的筛选与鉴定
3 结果
3.1 重组质粒pGEX-2T-NSH2的PCR扩增和双酶切鉴定
3.2 序列测定
4 讨论
第五章 NSH2蛋白的表达、纯化与同位素标记
1 试剂和材料
1.1 材料
1.2 试剂
1.3 试剂配制
2 方法
2.1 重组pGEX-2T-NSH2质粒的初步表达及表达效率分析
2.2 NSH2蛋白的LB培养基大量表达
2.3 NSH2蛋白的M9培养基大量表达
2.4 用GST亲和树脂进行亲和纯化及纯化结果分析
2.5 用FPLC系统的G75分子筛柱进行进一步纯化及纯化结果分析
3 结果
3.1 重组pGEX-2T-NSH2质粒的初步表达及表达效率分析
3.2 NSH2蛋白的LB培养基大量表达
3.3 NSH2蛋白的M9培养基大量表达
3.4 GST亲和树脂进行亲和纯化及纯化结果分析
3.5 FPLC系统的G75分子筛柱进行进一步纯化及纯化结果分析
4 讨论
第六章 NSH2蛋白的浓缩和NMR检测
1 试剂与材料
1.1 材料
1.2 试剂及配制
2 方法
2.1 透析换缓冲液
2.2 离心法超滤浓缩
2.3 样品的2D-NMR检测
3 结果
3.1 透析
3.2 离心法超滤浓缩
3.3 NMR对样品的检测
4 讨论
总结
参考文献
致谢
