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【6h】

具抑菌、抗炎及抗氧化功能的复合植物水提物制备及实验动物应用研究

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目录

摘要

符号说明

第一章 前言

1 植物提取物的活性成分及其生理功能

1.1 多糖

1.2 皂甙

1.3 黄酮类化合物

1.4 生物碱

1.5 多酚

2 植物提取物在动物上的应用研究

2.1 植物提取物在生猪饲养中的应用

2.2 植物提取物在禽类养殖中的应用

2.3 植物提取物在反刍动物饲养中的应用

3 植物提取物的研究现状与存在的问题

4 研究目的及意义

5 研究内容

第二章 单种植物水提物的体外试验

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试剂配制

1.3 试验方法

2 试验结果

3 讨论

3.1 植物水提物体外抑菌功能分析

3.2 植物水提物体外抗氧化功能分析

3.3 植物水提物抗炎功能分析

4 小结

第三章 植物水提物的组合及优势复方研究

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

2 试验结果

2.1 16个组合水提物抑菌率、抗炎率和半自由基清除能力的比较

2.2 三个复方的功能验证

3 讨论

4 小结

第四章 植物水提物复方的安全应用剂量研究

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

1.3 指标测定

1.4 数据处理与统计分析

2 试验结果

2.1 对小鼠健康、体重及采食量的影响

2.2 对小鼠脏器指数的影响

2.3 对小鼠血常规指标的影响

3 讨论

3.1 对小鼠生长性能的影响

3.2 对小鼠脏器指数和血常规的影响

4 小结

第五章 植物水提物复方的促生长效果研究

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

1.3 指标测定

1.4 数据处理与统计分析

2 试验结果

2.1 对小鼠生长性能、免疫器官指数与小肠长度的影响

2.2 对小鼠血清IgA、IgG、IgM含量的影响

2.3 对小鼠肝脏T-AOC、GSH-Px、SOD活性以及MDA含量的影响

3 讨论

3.1 对小鼠生长性能与免疫器官指数的影响

3.2 对小鼠肝脏抗氧化指标及血清免疫指标的影响

4 结论

第六章 植物水提物复方对肠道健康的保护作用研究

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

1.3 指标测定

1.4 数据处理与统计分析

2 试验结果

2.1 对小鼠精神状态、腹泻的影响

2.2 对空肠绒毛高度和隐窝深度的影响

2.3 对空肠IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB和TLR4基因水平的影响

3 讨论

3.1 对空肠绒毛高度和隐窝深度的影响

3.2 对空肠IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB和TLR4基因水平的影响

3.3 对小鼠腹泻的影响

4 小结

全文结论

参考文献

攻读学位期间发表的论文目录

致谢

声明

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摘要

针对目前植物提取物对复方的研究较少且作用机制不明等问题,本课题在此基础上,通过体外抑菌、抗氧化和抗炎试验,在小鼠上的安全应用剂量、促生长效果研究及肠黏膜损伤试验,研制出多功能且性价比较高的新型提取物复方,为最终应用到畜禽养殖中提供科学依据。主要研究结果如下:
  1.单种植物水提物的体外试验结果
  试验选取女贞子、桂枝等24种植物原料,制备0.5mg/μL生药的水提液。抑菌试验结果:石榴皮、青蒿、桂枝和肉桂对大肠杆菌抑制效果较强,抑菌率均高于50%,其他抑菌率较低或未检出抑菌效果。抗炎试验结果:除青蒿、补骨脂、鱼腥草和竹叶外,其余植物均可抑制LOX活力,石榴皮、鸡血藤、厚朴、柠檬和迷迭香的抑制率均高于90%。抗氧化试验结果:石榴皮、迷迭香和秦皮具有较强DPPH自由基清除能力,其IC50分别为0.08、0.31和0.71mg/mL,其余均在1.04~199.27mg/mL之间。
  2.植物水提物的组合及优势复方研究
  根据上述结果结合其性价比,选取石榴皮等5种原料为复方成分,采用正交设计进行不同配比研究,最终得出3个优势复方,分别以抑菌(C1)、抗炎(C2)和抗氧化(C3)功能为主。体外试验验证结果:C1、C2和C3的最小抑菌浓度(MIC)均为125mg/mL,抗炎IC50分别为0.434、0.138和0.166mg/mL,抗氧化IC50分别为0.31、0.40和0.22mg/mL。
  3.复方安全应用剂量研究
  选取78只Balb/c雌性小鼠,按体重随机分为4个处理:对照组(灌胃生理盐水),C1、C2和C3组,其中C1、C2和C3均设125、250、500、1000mg/kg BW4个水平(灌胃相应水提液),试验期21天。试验结果:整个饲养试验期间,所有实验小鼠精神状态良好,毛色光亮、未见异常死亡现象;低剂量C1和C2对小鼠生长性能无不良影响,高剂量C3组小鼠的生长性能较差;在正常范围内,C1、C2有提高小鼠免疫器官指数的趋势,低剂量C1和C2组血液白细胞计数(WBC)极显著提高(P<0.01),各水平C3组小鼠免疫器官指数和血液白细胞计数(WBC)均无显著变化(P>0.05)。由此发现添加量过高可能会对小鼠的生长性能、脏器指数和血常规参数有负面影响,故复方的添加剂量应当低于250mg/kg BW。
  4.复方促生长效果研究
  根据安全应用剂量研究结果,选取C1和C2两个复方开展对小鼠促生长效果的研究。选取90只15g左右的Balb/c雌性小鼠,分为3组:对照组(正常饮水),C1组(饮水中添加0.6mg/ml C1)、C2组(饮水中添0.3mg/ml C2),每组设3个重复,试验期21天。试验结果表明:与对照组相比,C1、C2均可使小鼠日增重提高13.3%(P<0.01)。
  5.复方对小鼠肠道健康的保护作用
  选取60只Balb/c雌性小鼠,分为4个处理:对照组(正常饮水)、LPS组(正常饮水)、LPS+C1组(饮水中添加C1)、LPS+C2组(饮水中添加C2),饲养试验至第21天,对照组注射生理盐水,其他3组注射LPS,分别于LPS注射后4h(8只)和24h(7只)屠宰、取样。LPS注射后4h试验结果表明:与对照组相比,LPS组空肠隐窝深度CD极显著升高(P<0.01),VH/CD极显著降低(P<0.01);与LPS组相比,LPS+C1和LPS+C2组VH/CD均极显著升高(P<0.01);LPS+C1组IL-6基因表达极显著降低(P<0.01);LPS+C2组IL-1β和IL-6表达分别降低40.1%和60.5%(P<0.01)。LPS注射后24h试验结果表明,与LPS组相比,LPS+C1组空肠VH极显著升高(P<0.01),VH/CD显著升高(P<0.05);LPS+C2组空肠VH极显著升高(P<0.01);LPS+C1组TLR4基因的表达量极显著降低(P<0.01);LPS+C2组IL-1β、IL-6、TNF-α、TLR4基因的相对表达量分别降低52.3%、59.5%、46.3%、57.9%(P<0.01)。
  综上,本课题研制出2个安全、有效的植物水提物复方(含石榴皮等5种组分),可通过增强机体免疫、抗炎及保护肠道健康等起到促生长作用。

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