摘要
第1章 文献综述
1.1 水稻稻瘟病
1.1.2 稻瘟病侵染机理
1.1.3 稻瘟病的防治措施
1.2 植物免疫机制
1.3 水稻抗稻瘟病基因的研究
1.3.1 完全抗性基因
1.3.2 部分抗性基因
1.4 植物类受体蛋白激酶
1.5 水稻抗病相关的激素
1.6 RNA干扰技术
1.7 基因编辑技术的研究进展
1.7.1 锌指核酸酶技术
1.7.2 TALEN核酸酶技术
1.7.3 CRISPR/Cas技术
1.8 本研究的意义
第2章 水稻品种TJ394对不同稻瘟菌菌株的接种反应
2.1 材料和方法
2.1.1 供试水稻品种
2.1.2 主要仪器
2.1.3 主要试剂
2.1.4 水稻发芽和育苗
2.1.5 稻瘟病菌活化培养和孢子收集
2.1.6 稻瘟菌孢子喷雾接种
2.1.7 病级数据的统计分析
2.2 结果与分析
2.3 小结
第3章 水稻抗性相关基因RNAi转基因株系的接种鉴定
3.1 材料和方法
3.1.1 供试水稻品种
3.1.2 主要仪器
3.1.3 主要试剂
3.1.4 转基因水稻育苗
3.1.5 稻瘟病菌活化培养和孢子收集
3.1.6 稻瘟菌孢子喷雾接种
3.1.7 病级数据的统计分析
3.1.8 水稻叶片组织取样
3.1.9 水稻RNA提取和纯化
3.1.10 cDNA的合成与半定量RT-PCR检测
3.1.11 水稻靶基因的qRT-PCR检测
3.2 结果和分析
3.2.1 RNAi转基因水稻的稻瘟病抗性鉴定
3.2.2 RNAi转基因水稻靶基因转录水平的qRT-PCR分析
3.2.3 XY23和XY14基因的独立转化系接种鉴定
3.3 讨论
第4章 基于CRISPR/Cas9技术的水稻pf21基因编辑材料的创制及稻瘟病抗性鉴定
4.1 材料和方法
4.1.1 供试材料
4.1.2 主要仪器
4.1.3 主要试剂
4.1.4 DNA载体构建
4.1.5 阳性转基因水稻植株的获得及验证
4.1.6 靶序列酶切和测序分析
4.1.7 水稻发芽和育苗
4.1.8 稻瘟病菌活化培养和孢子收集
4.1.9 孢子喷雾接种和病级调查
4.1.10 水稻叶片接种后取样
4.1.11 水稻RNA提取和纯化
4.1.12 cDNA的合成与半定量RT-PCR检测
4.1.13 水稻病程相关基因的qRT-PCR检测
4.2 结果和分析
4.2.1 日本晴Pi21基因的靶位点设计
4.2.3 T1植株T-DNA的剔除和pi21纯合突变的筛选
4.2.4 pi21基因编辑株系的抗稻瘟病接种鉴定
4.2.5 pi21基因编辑株系PR基因的表达分析
4.3 讨论
第5章 结论和展望
参考文献
附录
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
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