利用荧光蛋白在水稻中建立二元转座因子标签系统

摘要

缩略词表

第1章 文献综述

引言

1．1 T-DNA标签在植物功能基因组学研究中的应用

1．2 Ac/Ds转座因子标签系统

1．3 Ac/Ds转座因子系统中的报告基因

1．4 Ac/Ds转座因子的转座行为和影响转座的因素

1．5 Ac/Ds转座因子在植物基因组中插入方式

1．6 克隆T-DNA和转座因子插入位点侧翼序列的方法

1．7 Ac/Ds转座因子系统在水稻中的应用

1．8 Ac/Ds转座因子系统所面临的挑战

1．9 本研究的目的和意义

第2章 Ac和Ds转基因水稻T0代植株的获得及T1代植株遗传分析

2．1 材料与方法

2．1．1 水稻品种和农杆菌菌株

2．1．2 仪器设备和试剂

2．1．3 农杆菌的培养

2．1．4 成熟胚愈伤组织诱导培养

2．1．5 水稻愈伤组织与农杆菌的共培养

2．1．6 抗性愈伤的筛选培养

2．1．7 抗性愈伤组织分化培养

2．1．8 生根培养

2．1．9 转基因水稻T1代植株PCR分析

2．2．10 DNA片段的切胶纯化

2．2 结果和分析

2．2．1 T0代转基因水稻植株的获得

2．2．2 T1代转基因植株水稻植株遗传分析

2．2．3 T1代转基因水稻植株插入位点分析

2．2．4 Ac-46和Ds-1 T1代转基因系水稻纯合植株的鉴定

2．3 讨论

第3章 （Ac/Ds）F1杂种的配置及其F1植株的分析

3．1 材料与方法

3．1．1 实验材料

3．1．2 仪器设备和试剂

3．1．3 实验方法

3．2 结果与分析

3．2．1 转基因系（Ac/Ds）F1杂种的配置及其F1杂种的筛选

3．2．2 （Ac/Ds）F1植株体细胞转座的检测

3．2．3 Ds切离位点的序列多态性

3．2．4 （Ac/Ds）F1植株发生体细胞转座的时间分析

3．2．5 AcPTase、GFP、HPT和RFP基因转录水平的RT-PCR分析

3．3 讨论

第4章 （Ac/Ds）F1花粉及F2植株的分析

4．1 材料与方法

4．1．1 实验材料

4．1．2 实验方法

4．1．2 （Ac/Ds）F1植株花粉的共聚焦显微观察

4．2 结果与分析

4．2．1 转座的Ds因子在花粉中与Ac发生遗传分离

4．2．2 （Ac/Ds）F2代植株遗传分析

4．2．3 Ds稳定插入植株的分子鉴定

4．2．4 旁侧序列的克隆

4．3 讨论

第5章 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

附录Ⅰ

攻读学位期间取得的研究成果

致谢

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